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稀有植物蒜头果基因组dna 提取方法的研究 - 云南大学学报
( ) , 2007, 29 ( 3) : 3 13~ 3 16 CN 53- 1045/ N ISSN 0258- 797 1
Journal of Yunnan Un vers ty
DNA
1,2 3 1 1 1 1
袁 燕 , 韩剑萍 , 郑东邦 , 袁青梅 , 肖 涵 , 戴晓畅
( 1. , 650091; 2. , 650031;
3. , 650031)
: CTAB SDS pH DNA,
DNA . : CTAB SDS pH
DNA OD260/ OD280 1. 8~ 2.0 , , DNA
. CTAB DNA ,
.
: ; DNA;
: Q 946. 2 :A :0258- 7971(2007) 03- 0313- 04
( M al an ia ol efi er a Ch n et S. Lee ) .
( ) 1. 2 CTAB, SDS, Tris ,
[ 1]
( ) , ( Olacaceae) ( polyvinylpyrrolidone PVP) , ( Ascor-
, 51. 85% ~ 67. 0% , bic acid, VitC) , -
, .
, , , 1. 3 DNA
[2, 3]
, 1. 3. 1 样品的预处理 0. 1 g
. , 0. 02 gPVP ,
. , ( 100 mmol/ L T ris
[ 4] [5]
- HCl, 5 mmol/ L EDTA, K) , ,
[6,7] [8]
30 min, 10 000 r/ min 10 min, ,
[9]
. 1 , .
[ 10]
1.3. 2 改进CTAB 法 ,
, 680 L 3 CTAB ( 100 mmol/ L
, , Tris- HCl, 1. 4 mol/ L NaCl, 20 mmol/ L EDTA, 20
, g/ L PVP, 30 g/ L CTAB, pH= 8. 0) 100 L -
DNA , , , 65
. 1 h, 1/ 10 3 mol/ L NaAc
, , 30 min, 10 000 r/ min 10 min,
1
,
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