胞内氧化还原水平对嗜热厌氧乙醇菌发酵代谢的影响.pdf

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，３２（７）：７３７８ 胞内氧化还原水平对嗜热厌氧乙醇菌 发酵代谢的影响 孙焕民　过　敏　伊日布斯 （昆明理工大学生命科学与技术学院　昆明　６５０５００） ＋ 摘要　辅酶ＮＡＤＨ／ＮＡＤ 在细胞内氧化还原反应中起着重要的作用，是细胞生长和能量代谢必 ＋ 不可少的辅因子。调节微生物胞内ＮＡＤＨ／ＮＡＤ 的比率是定向改变微生物代谢，高效获得目标 代谢产物的有效手段。嗜热厌氧乙醇菌 （Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒｅｔｈａｎｏｌｉｃｕｓ）是高温厌氧菌中乙醇产 量较高的代表性菌株，本文利用不同氧化还原态的碳源改变 Ｔ．ｅｔｈａｎｏｌｉｃｕｓ的胞内ＮＡＤＨ／ＮＡＤ＋ 含量和比例，进而研究了其对细胞生长、代谢产物分布的影响。以不同比例的葡萄糖／甘露醇作 为混合碳源发酵，胞内氧化还原水平、细胞的生长特性、代谢产物都发生了不同程度的差异，以葡 萄糖作为唯一碳源进行培养时，Ｔ．ｅｔｈａｎｏｌｉｃｕｓ生长良好，乙醇产量为０．７９ｇ／Ｌ，但胞内ＮＡＤＨ／ ＋ ＮＡＤ 比值和乙醇／乙酸的比值都比较低，分别为０．４７和４．８２；随着葡萄糖在混合碳源中比例的 ＋ 下降，ＮＡＤＨ／ＮＡＤ 比值增高，发酵产物中乙醇／乙酸比值也呈现上升的趋势。而以甘露醇作为 ＋ 唯一碳源时，发酵产物中乙醇浓度为０．３８９ｇ／Ｌ，ＮＡＤＨ／ＮＡＤ 比值和乙醇／乙酸的比值分别为 １．０４和１６．０。 ＋ 关键词　ＮＡＤＨ／ＮＡＤ 　高温厌氧乙醇菌　乙醇发酵 中图分类号　Ｑ８１５ ＋ 　　辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（ＮＡＤＨ）和尼克酰胺 杆菌细胞内ＮＡＤＨ／ＮＡＤ 比例升高时，丙酮酸脱氢酶 ＋ ［５］ 腺嘌呤二核苷酸（ＮＡＤ ）在生物氧化还原反应中起着 复合体的活性会被抑制，同时Ｌｅｏｎａｒｄｏ等 对大肠杆 重要的作用。吡啶核苷酸辅酶是细胞生长和能量代谢 菌的研究表明ＮＡＤＨ可以诱导乙醇脱氢酶的表达，并 必不可少的辅因子。在糖酵解、柠檬酸循环和其它一 促进乙醇产生，在以不同氧化还原态底物为碳源进行 ＋ 些涉及生物电子转移反应的新陈代谢中起着重要调节 发酵时，代谢产物分布与胞内ＮＡＤＨ／ＮＡＤ 比例存在 ＋ 作用，ＮＡＤＨ在偶联合成代谢，能量产生与发酵代谢输 明显的相关性，即高 ＮＡＤＨ／ＮＡＤ 比例会使碳代谢流 ［１３］ ［６］ 出中扮演着重要角色 。 向乙醇等还原性产物。酵母中也存在同样的情况 。 ＋ ＋ 高温厌氧菌Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍａｃｅｔｏｂｕｔｙｌｉｃｕｍ中，ＮＡＤＨ水平是 　　微生物细胞内ＮＡＤＨ／ＮＡＤ 、ＮＡＤＰＨ／ＮＡＤＰ 的 比例反映细胞内的氧化还原水平，厌氧微生物可以通 有机酸向有机溶剂转变的调节信号，