qcm-d研究蛋白质与多糖的相互作用 - 苏朝晖 - 长春应用化学研究所.pdf

第２７卷 第５期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．２７Ｎｏ．５ ２０１０年５月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ｍａｙ２０１０ 檵檵檵檵殝 檵 殝 殝檵 研究论文殝 檵檵檵檵 ＱＣＭＤ研究蛋白质与多糖的相互作用 ａ ｂ ａ 林　园　黄庆荣　苏朝晖 ａ （中国科学院长春应用化学研究所，高分子化学与物理国家重点实验室　长春 １３００２２； ｂＲｕｔｇｅｒｓ大学食品科学系，美国新泽西州０８９０１） 摘　要　应用具有耗散因子功能的石英晶体微天平（ＱＣＭＤ）检测了多糖多层膜的构筑过程以及蛋白质在多 层膜上的吸附行为。研究结果表明，通过层层组装的方法，可以实现多糖卡拉胶多层膜的构筑，并且随着卡拉 胶电荷密度的增加，其组装量减少。研究了牛体血清蛋白（ＢＳＡ）在卡拉胶上的吸附行为。结果发现，ＢＳＡ的吸 附行为强烈地依赖于卡拉胶的电荷密度和基体的粗糙度。通过ＱＣＭＤ实时监测了ＢＳＡ在卡拉胶上的动力学 吸附曲线，同时根据 Ｄ值推测了ＢＳＡ在不同的基底表面上所形成的结构及吸附行为。 Δ 关键词　石英晶体微天平（ＱＣＭＤ），蛋白质，多糖 中图分类号：Ｏ６３６．１　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１０）０５０５０５０５ ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１０９５．２０１０．９０４４７ 蛋白质和多糖是生物体系和食品工程中２种主要的物质，二者的相互作用在食品工业中对控制 ［１］ 食品的组织结构及稳定性起着决定性的作用 ，因此，更好地理解蛋白质和多糖间的相互作用对于设 计一些具有功能性的食物有重要意义。在过去的２０多年中，有关蛋白质和多糖间的相互作用的研究 均侧重在溶液状态下展开［２～５］。大量的研究表明，蛋白质和多糖间的相互作用主要是静电力起主导作 用，因此溶液的ｐＨ值、离子强度、多糖上的电荷密度以及蛋白质和多糖的混合比例均强烈地影响着蛋 ［６］ ［２－５］ 白质和多糖间的相互作用 。尽管关于蛋白质和多糖在溶液状态下的相互作用已有大量的报道 ， 但有关蛋白质和多糖在表面上的相互作用的报道很少［７］，特别是关于蛋白质在生物表面上的很多吸附 行为还不很清楚，这主要是因为缺乏有效的检测手段。石英晶体微天平（ＱＣＭ）作为微质量传感器具有 结构简单、成本低和测量精度高（可以达到纳克量级）的优点，被广泛应用于化学、物理、生物、医学和表 ［８，９］ 面科学等领域 。随着科学技术的发展，出现了具有耗散因子功能的石英晶体微天平（ＱＣＭＤ），极大 地拓宽了ＱＣＭ的应用空间。通过测量耗散系数（Ｄｉｓｓｉｐａｔｉｏｎ，Ｄ），能够给出更多关于表面上吸附的薄膜 的性质，从而极大地丰富了薄膜的表面信息，为研究微观变化过程，破译微观作用机理提供了一种强有 力的手段。并且其具有实时跟踪检测微观过程的变化、获取丰富在线信息的优点，是其它方法无法比拟 的。本文利用层层组装方法将多糖固定在表面上，利用 ＱＣＭＤ研究了蛋白质在多糖表面上的吸附行 为。 １　实验部分 １．１　试剂和仪器 ＴＭ Ｄ３００型石英晶体微天平（ＱＣＭＤ，瑞士ＱＳｅｎｓｅ公司）；Ｍｕｌｔｉｍｏｄｅ ａ 型原子力显微镜（ＡＦＭ，美 Ⅲ ５ ５ 国Ｎａｎｏｓｃｏｐｅ公司）。聚二烯丙基二甲基胺盐酸盐