水杨酸与烟草铜锌超氧化物歧化酶的相互作用 - 医学期刊.pdfVIP

( ) 第 31 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究报告 第 3 期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2003 年 3 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 283～286 水杨酸与烟草铜锌超氧化物歧化酶的相互作用 1 2 2 1 1 1 盛良全 　刘少民 　贾莉莉 　徐小龙 　解永树 　刘清亮 1 ( ) 2 ( ) 中国科学技术大学化学系 ,合肥 230026 　　 中国科学技术大学食品系 ,合肥 230052 ( ) ( ) 摘 　要 　利用邻苯三酚自氧化法监测了磷酸盐缓冲体系中水杨酸 SA 对超氧化物歧化酶 SOD 活力的影响。 通过荧光光谱法研究了水杨酸与超氧化物歧化酶的相互作用机制 ,求得两者结合的形成常数和配位数 ,使用 Frster 非辐射能量转移技术求出了两者的结合位置距色氨酸残基间的距离为 2. 60 nm 。 关键词 　水杨酸 ,铜锌超氧化物歧化酶 ,酶活力 ,荧光光谱 1 　引　　言 超氧化物歧化酶是生物体重要的抗氧化酶之一 ,分为 FeSOD , MnSOD 和 CuZnSOD 。CuZnSOD 是一 种广泛存在于动、植物体且研究最为普遍的超氧化物歧化酶同工酶 ,人们已试图研究外加试剂与其相互 作用 ,获得了一些有意义的结果1 ,2 。1979 年 White 首次证实水杨酸是植物抑制病源扩展 ,增强植物抗 ( ) 病性的主要物质之一。体内水杨酸含量的增加可以系统地诱导病程相关蛋白质 PR蛋白 的合成 ,提高 3 ( ) 体内 H O 的含量。1991 年 Chen 等从烟草叶片中得到一种可溶性的水杨酸受体蛋白 SABP ,1993 年 2 2 纯化了这种蛋白并克隆了它的 CDNA 基因 ,发现它与过氧化氢酶有高度的同源性 ,具有催化 H O 成为 2 2 水和分子氧的活性4 。1997 年 Du 5 从烟草中得到另一种水杨酸结合蛋白命名为 SABP2 ;1999 年曾庆 6 平 等报道了大蒜培养细胞对水杨酸的应答比对温度和水分胁迫的应答更为强烈 ,其主要特征是 SOD 的大量生成 ,证明体内 SA 含量与 SOD 的相关性。然而至今尚未检索到有关 SA 与 SOD 相互作用的体外 实验报道。本文用邻苯三酚自氧化法监测了磷酸盐缓冲体系中 SA 对 SOD 活力的影响 ,证明了两者相 互作用的存在 ,用荧光