小鼠肺癌原位模型的完善及三仙丸抑瘤作用初探 - 上海中医药杂志.pdf

上海中医药大学学报　第３０卷　第３期　２０１６年５月 ·５３· 实验中医 ＤＯＩ：１０．１６３０６／ｊ．１００８８６１ｘ．２０１６．０３．０１３ 小鼠肺癌原位模型的完善及三仙丸 抑瘤作用初探 刘　菲，胥孜杭，朱诗国，邹纯朴 上海中医药大学基础医学院　（上海　２０１２０３） 【摘　要】　目的：进一步完善Ｃ５７ＢＬ／６小鼠肺癌原位模型，并观察中药三仙丸对该模型小鼠肿瘤的抑制作 用。方法： 在原有Ｃ５７ＢＬ／６小鼠肺癌原位模型的基础上，根据造模原位接种 Ｃ５７ＢＬ／６小鼠肺腺癌细胞 ① （Ｌｅｗｉｓｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ，ＬＬＣ）和虫萤光素酶（ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）稳定结合的ＬＬＣｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ细胞株数量的不同，使用活体 成像技术对模型小鼠活体成像曝光时间、肿瘤生长情况、肺癌的转移情况进行监测，并观察生存期，选出最 优小鼠肺癌原位模型。 肺癌原位模型小鼠灌胃给服三仙丸，从造模第４天开始连续给药直至小鼠死亡， ② ５ 观察小鼠肿瘤大小和生存期。结果：活体成像时采用自动曝光效果最佳；造模接种细胞数 １×１０／只时小 ≥ ５ ５ 鼠肺癌原位模型稳定，且接种细胞数为１×１０／只和５×１０／只的模型小鼠中位生存时间分别为３７．５ｄ和 ５ ２４．５ｄ（Ｐ＜０．０５）。接种细胞数为 １×１０／只的小鼠，第 ３９天时三仙丸组小鼠肿瘤明显小于对照组 （Ｐ＜０．０５）；对照组和三仙丸组小鼠中位生存时间分别为４２ｄ和５６ｄ（Ｐ＞０．０５）。结论：构建小鼠肺癌原 ５ 位模型时接种细胞数为１×１０／只时造模效果佳；并用此模型证明了三仙丸对肿瘤的抑制作用。 【关键词】　非小细胞肺癌；原位模型；三仙丸；活体监测 　　肺癌在国内外都是一种高发病率和高死亡率 肺，成功构建肺癌原位模型。此构建肺癌原位模型 的恶性肿瘤［１２］ ［３］ ，其中８０％左右为非小细胞肺癌 。 的方法无需打开胸腔，操作手法简单，无手术风险， 建立更接近人体肿瘤微环境的动物模型是研究肺 可重复性高；但未对接种细胞数量、肿瘤生长情况、 癌机制和抗癌药物的关键，而用化痰法治疗肺癌是 小鼠生存期、肺癌的转移情况等方面进行观察。故 ［４５］ 目前中医界较为公认的一种治疗方法 。故基于 本研究拟在胥孜杭原工作基础上，优化肺癌原位动 ［６７］ 痰与肺癌相关性 ，探索理气化痰药三仙丸治疗 物模型，并探索三仙丸对模型小鼠的治疗效果。 肺癌的效果，方中天南星、半夏化痰散结，香附理 １　材料与方法 气，使气行则痰行，全方共奏行气化痰之效。 ［８］ 目前，已有胥孜杭等 的“小鼠肺癌原位模型 １．１　 实验材料　 的建立”，该方法将 Ｃ５７ＢＬ／６小鼠肺腺癌细胞 １．１．１　动物　采用６周龄Ｃ５７ＢＬ／６小鼠４８只，雄 （Ｌｅｗｉｓｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ，ＬＬＣ）和虫萤光素酶（ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ） 性