纤维素酶的酶学特性论文.pdfVIP

酶制剂磊勰烈襞糕褊而丽丽旷—————————————一 纤维素酶晌酶学特性米 黄燕华1，冯定远2 (1．广东省珠海市农业科学研究中心，珠海519070 2．华南农业大学动物科学学院，广州 510642) 摘要：本文论述了纤维素酶的来源，纤维素酶的组成及其分子结构与功能，纤维素酶的主 要理化性质，纤维素酶酶活的测定及影响酶活的因素，纤维素酶降解纤维素的机理。全面综 述了纤维素酶的酶学特性。 关键词：纤维素酶；酶学特性；来源；机理 日粮纤维素是影响饲料利用的主要因素，纤维素含量过高会抑制畜禽生长。多数研究报道表明纤 维素酶应用于畜禽的13粮中，对改善饲料消化率、提高动物生产性能有积极作用。但由于对纤维素酶 的酶学性质认识不足，导致不同的研究结果并不完全一致。本文对纤维素酶的酶学性质作一全面的综 述，旨在对纤维素酶有系统的了解，以便在实践中可以正确、有效的使用纤维素酶。 1纤维素酶的来源 纤维素酶来源广泛，大体上分为三方面：微生物来源、动物性来源和生物工程来源。 能分泌纤维素酶的微生物主要有霉菌、担子菌等真菌，也包括细菌、放线菌和一些原生动物。目 菌、生孢纤维黏菌和纤维杆菌等。但由于细菌分泌的纤维素酶量少(低于0．19／L)，同时产生的酶属胞 内酶或者吸附于细胞壁上，故很少用细菌作纤维素酶的生产菌种。丝状真菌则能较大量地产生纤维素 酶，且能分泌到细胞外，属胞外酶，这利于酶的提取。 v／r／． 利用微生物生产纤维素酶的研究开展较早。早期许多研究集中在来源于绿色木霉(Tr／choderma derma viride)及其近缘的菌 II—— *获得国家科技攻关计划子课题 -J 十工程”优秀人才培养基金“稻谷型 日粮专用饲料酶制剂的研究”(编号：唧4)的资助。 272 II 纤维素酶 木霉、根霉、青霉、嗜纤细菌、产黄单孢茵、侧孢菌等，其中绿色木霉应用最为广泛。 变剂，可提高生产纤维素酶的能力；上海植生所纤维素酶组以野生木霉As3．31302和拟康氏木霉为出发 反刍动物依靠瘤胃微生物可消化纤维素，因此可以利用瘤胃液获得纤维素酶的粗酶制剂。张晓华 等(1995)报道了一个厌氧中温分解纤维素的瘤胃梭菌新种。此外，也可利用组织培养法获得所需要 的产纤维素酶微生物。 生物技术的发展，使饲用纤维素酶的来源有所拓宽，产酶微生物菌种日益增多。迄今，人们已从 四十多种细菌和数种真菌中克隆到了纤维素酶基因，同时构建了这些酶的基因文库，其中一些酶的基 因已在大肠杆菌和酵母中得到了表达。因此，将已克隆到的基因同高效表达基因的启动子和染色体起 始位点融合则可表达，且表达量增加；同时，利用基因工程手段对纤维素酶分子进行改造，使其活性 提高，耐受性增强。因此，可以解决一些纤维素酶活性低的问题(如抗逆性、pH稳定性、热稳定性 等)。能在饲料中推广应用的纤维素酶必须具有良好的热稳定性。一般来说，NSP酶在80℃时酶活损失 50％以上；此外饲料中纤维素酶的最终作用场所是动物正常体温(37～40℃)的胃肠道中，纤维素酶 必须在常温下具有较高的活性。这方面的研究已有报道，如巴斯德研究所利用热纤梭菌提供的基因来 源，通过定点突变技术，在大肠杆菌中表达纤维素酶基因的同时，得到了一种新的纤维素酶。近年来， 已从嗜温微生物中发现了多种耐高温的纤维素酶，对他们的结构和热稳定性的研究将为纤维素酶基因 能力强，故近些年已有了对这两个远属问的基因能否相容性遗传和表达的研究。艾云灿(1997)等通 过改良常规方法成功地获得了两属间具有纤维素酶系杂种优势的稳定重组单体ATH一1376，从而为降低 产酶或菌体培养成本提供了新的途径。 2纤维素酶的组成及其分子结构与功能 纤维素酶是指所有参与降解纤维素最终被转化为葡萄糖的各种酶的总称。它是一类复杂的复合物， 故而又被称为纤维素酶系(cellulase system)。从广义的角度分，纤维素酶