人类与医学遗传学8、临床遗传学研究进展-20150415.pptVIP

* * * * * 本研究以肝豆状核变性作为研究模型对本方法进行研究。 * 利用PCR扩增结合 sanger测序，对四个家系的先证者及胎儿进行检测。。。四个家系有三种遗传类型。 The pedigrees and Sanger sequences showing genotypes of four heterozygous parents and their wild type(C) or heterozygous (A,D) or compound heterozygous fetus(B) in ATP7B gene, respectively. In the four unrelated families , proband carrying compound heterozygous mutations inherited from their heterozygous carrier parents (Table S1) . * 循环血单分子扩增和重测序技术 1.首先在从2mL中血浆中提取的血浆游离DNA上加入通用的接头，其中包括6个碱基的barcode序列。 2.变性后，使用taq连接酶进行环化。 3.将设计好的背靠背的、靠近待测点附近的成对多核苷酸作为引物，进行反向pcr。 4.以生成的线性DNA分子为模板，引入测序引物并进行扩增。 5.QC定量后使用Miseq进行