不同染色方法对肺孢子菌的诊断作用比较.pdf.pdfVIP

临床输血与检验 2012年4月第 14卷第2期 不同染色方法对肺孢子菌的诊断作用比较 鲁怀伟 胡晓文 徐傲 常文娇 马筱玲 马筱玲 武超 【摘要】 目的 比较革兰染色、苏木素一伊红染色(hematoxylinandeosinstain，HE)、吉姆萨染色(Giemsastain)和六 胺银染色 (GomorisMethenaminesilvernitratestain，GMS)在诊断肺孢子菌肺炎中的作用。方法 收集 1例典型肺孢子菌 感染患者的痰液，经消化处理，离心，涂片，分别进行革兰染色、HE染色、吉姆萨和六胺银染色，油镜观察。结果 革兰染色 未见可疑结构；HE染色肺孢子菌包囊壁不着色，呈透明的晕圈状，囊 内小体 4～8个呈蓝紫色}吉姆萨染色包囊壁不着色， 可见清楚的轮廓，囊 内小体核蓝色，囊 内容物紫红色；六胺银染色肺孢子菌包囊壁棕到黑色，结构清楚，囊 内可见圆形的核 状物和特征性的括弧状结构。结论 常规使用的革兰染色无法诊断肺孢子菌，其他3种方法均可选择，合理的方案是用吉姆 萨染色筛选，用六胺银染色确证。 【关键词】 肺孢子菌肺炎 六胺银染色 革兰染色 HE染色 吉姆萨染色 【中图分类号】 R382．3 【文献标识码】 B 【文章编号】 1671—2587(2012)02—0147—02 随着器官移植的大量开展以及免疫抑制剂的 值 1．10-．~1．72)，LDH2250IU／L(参考值 313～ 大量使用 ，机会病原菌引起 的临床感染逐年增多。 618)，CRP238mg／L(参考值0--8)。结合病史考 卡 氏肺孢子菌肺 炎 (PneumocystisCariniiPneu— 虑PCP可能 。治疗措施 ：面罩吸氧 ，复方 SMZ3# monia，PCP)是由卡 氏肺孢子菌引起的机会性感染 q8h，甲强龙 40mgq12h，停用抗排异药物，保肝 、 性疾病 ，主要发生在肿瘤化疗患者、器官移植患者、 护 胃、补液支持治疗。经治疗呼吸困难逐渐缓解 ， 自身免疫性疾病及艾滋病患者等免疫功能低下的 SPO。94 ～98 ，HRCT显示肺部炎症明显吸收。 人群[1≈]，其感染率逐年上升。由于卡氏肺孢子菌体 12月13日痊愈出院。 外不能培养，PCP确诊依赖于在患者的肺组织、肺 2 标本来源 痰标本由患者 自然咳痰取得。 泡灌洗液或痰液中找到肺孢子菌的包囊或滋养体。 3 痰 的消化处理涂片 痰液加入等量新鲜 的 本文 比较了革兰染色、HE染色、吉姆萨染色和六 0．0065mol／L二硫苏糖醇 (Sputasol，OXIOD) 胺银染色方法在 1例临床诊断为PCP患者的病原 35℃振荡至标本完全消化 。3000g离心 5min浓 学诊断中的作用，现报道如下。 缩 ，将沉淀物涂片，空气干燥并加热固定。 4 革兰染色 革兰染液购 自法 国生物梅里埃公 材料与方法 司，按说明书方法染色。 1 病例简介 患者，男，25岁，肾脏移植术后4月， 5 HE染色 (1)将 已固定好的痰涂片放入苏木精 出现血尿，血肌酐800ttmol／L，2010年 11月16 水溶液中染色数分钟 。(2)酸水及氨水中分色，各数 日入住泌尿外科，人院经大剂量激素冲击治疗后血 秒钟。(3)流水冲洗 1h后人蒸馏水片刻。(4)人 尿消失，血肌酐降至200z／mol／L左右。随后 出现咳 7O 和9O 酒精 中脱色各10min。(5)入酒精伊红 嗽、咳痰及发热，并迅速出现呼吸困难，2d内明显 染色液染色2．-~3min。 加重，CT显示两肺毛玻璃样改变，广谱抗生素治 6 吉姆萨染色 标本用 甲醇固定 10min，用滴管 疗无效。11月29日转入呼吸内科治疗 ，FIO。0．45， 把染液布满盖片，染色10~15