栀子苷发酵转化栀子蓝色素的初步研究.docVIP

栀子苷发酵转化栀子蓝色素的初步研究 钱骅1，赵亚南1.2，赵伯涛1,2 *， 闫淑珍2 ，陈斌1,2 ，张卫明1,2 （1. 南京野生植物综合利用研究院，江苏 南京 210042；2. 南京师范大学生命科学学院，江苏 南京 210046） 摘要：本实验利用一株从植物中分离出的丝状真菌，以栀子苷为底物，以液态摇瓶发酵的方式转化得到栀子蓝色素溶液。分别考察了摇瓶装量、培养时间、pH、接种量和谷氨酸钠的加入量对色素生成的影响。最后确定的条件为：摇瓶装量50/250mL，培养时间120h，起始pH值为7.5，接种量为4%，E590nm 1cm(1%)≥90。 关键词：栀子蓝色素；液态发酵；转化率；色价 Study on the Fermentation of Gardenia Blue Pigment Qian Hua1 ,Zhao Yanan1,2 ,Zhao Botao1,2﹡Yan Shuzhen2, ChenBin1,2, Zhang Weiming1,2 (1. Nanjing institute for the comprehensive of wild plants, Nanjing 210042, China; 2. Life science academy of nanjing normal university, Nanjing 210046, China ) Abstract: A Filamental Fungus has been seperated and screened from a plant.It could be used in fermentation to transport Geniposide to Gardenia blue. The effects of culture broth quantity, time,pH,inoculum and added ratio of sodium glutamate on gardenia blue formation were researched. The results induced that the optimum conditions was as follows: culture broth quantity 50/250 mL flask,fermentation period 120 h,pH 7.5,inoculum 4%(v/v) and sodium glutamate 2%.The transformation of Gardenia blue was 95.8% by HPLC. The fermentation broth was dried,we got the more pure Gardenia blue pigment 4.916 g every 100 mL, (E590nm 1cm(1%)≥90). Key words: Gardenia blue ;Iiquid fermentation ;conversion rate ;Color Value 前言 栀子蓝色素是一种天然水溶性蓝色素[1]，上世纪90年代初，我国就已经将栀子蓝色素列为食品添加剂，可以用于食品、化妆品等的染色[2-3]，具有良好的应用前景。但我国到目前仅个别厂家少量生产，且质量较低，无法满足日益增长的市场需求。 栀子蓝色素是由栀子苷经β-葡萄糖苷酶水解得到京尼平，京尼平再与伯氨基酸反应制得。由其反应机理可知，转化的关键在于β-葡萄糖苷酶的作用。因此，本实验利用一株可产β-葡萄糖苷酶的丝状真菌，以液态摇瓶发酵的方式转化栀子蓝色素，主要对各转化条件和转化率做了初步探讨。采用高效液相法检测反应前后的栀子苷的量来计算转化率。 1 材料和方法 1.1材料与仪器 菌种：丝状真菌（由南京师范大学生科院闫淑珍老师提供） 栀子苷标准品（购自中国药品生物制品检定所，批号110749-200511），栀子苷（纯度50%，自行制备）谷氨酸钠（河南莲花味精厂）； NaNO3、KH2PO4均为分析纯；乙腈（色谱纯）纯化水 752紫外可见分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司）；Agilent 1200系列高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）；SKY-211BG型摇床（上海苏坤实业有限公司） 1.2 培养基 *基金项目：国家十二五支撑计划资助（2011BAD33B03） 作者简介：钱骅（1966-)，女，浙江嵊州，副研究员，研究方向：植物资源开发与利用。E-mail：qianhua1999@126.com；Tel 通讯作者：zbotao@ 025 种子培养基：马铃薯 200 g、葡萄糖20 g、水1000 mL；121 ℃