羊胎盘肽的提取及质量标准的初步研究.pdfVIP

维普资讯 HEILONGJIANGMEDICINEANDPHARMACYOCt．2007，Vo1．30No．5 ·13 · 羊胎盘肽的提取及质量标准的初步研究 赵 云h。，张 华 ，李 鹏。，蔡亚平 ，秦学功 (1．黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，黑龙江 大庆 163319}2．黑龙江八一农垦大学动物科学技术学院，黑龙江 大庆163319) 摘要；目的；从健康山羊胎盘中分离提取具有生物学活性的羊胎盘肽，并初步确定其质量标准。方法：采用超微粉碎、反复 冻融、离心和超滤的工艺分 离提取羊胎盘肽，测定pH、分子量，并进行 萦外扫描。蛄果；成功分 离提取羊胎盘肽，pH在 6．2～6．8，分子量主要集中35KDa附近和5O～66．2KDa，双缩脲反应和茚三酮反应显示其主要成分含有蛋白质多肽，最大萦外 吸峰 260~280nm。蛄论 {本生产工艺可用于羊胎盘肽的制备 。 关键词 ：羊胎盘肽 }提取}质量标准 中围分类号；R284．2 文献标识码；A 文章编号：1008—010442007)05—0013～O2 胎盘 (placenta)又名紫河车，胎盘性昧甘、咸、温，入肺、 i．染色；j．脱色Ik．与对照分子量蛋白比较。④羊胎盘肽原液 心、肾经，有补肾益精，益气养血之功。人胎盘肽 (human 蛋白含量测定 ：用磷酸缓冲溶液PBS稀释，得羊胎盘肽稀释 placentalpeptide)是从健康产妇胎盘中提取的具有免疫功能 溶液，TU一1800紫外可见分光光度计分别进行测定在 的活性成分 ，具有调节机体免疫功能等多方面药理学活性， 260nm和280nm处的紫外光吸收值Azso姗和Azeonm，以PBS磷 但由于人胎盘肽的数量有限及其伦理学的问题 的存在，对动 酸缓冲液为参比对照。将260nm和280nm波长处测得的吸光 物胎盘的研究开发就具有重要意义_1]。现代医学研究发现， 度按下列公式计算蛋白质浓度。 羊胎盘(goatplacentalpeptide)具有调节机体免疫力、改善微 C一1．45×(A28onm一0．47A260姗)×稀释度 循环、降低血液中的胆固醇、调节人体荷尔蒙和机体内分泌、 在公式中：C：蛋白质质量浓度 (mg／mL) 有效抑制分解黑色素形成等功效；羊胎盘所含有的Al、Ba、P、 Azso姗：蛋白质溶液在280nm处测得的吸光度。A2o丑m；蛋 Si等微量元素与动物的生命活动密切相关 ，是动物生理代谢 白质溶液在260am处测得的吸光度[q]。⑤羊胎盘肽原液核酸 所必需的微量元素}羊胎盘中富含超氧化物歧化酶(SOD)， 含量测定：将样品稀释后，测定260nm处吸光度CA值)。当吸 SOD作为机体内过剩自由基的天然消除剂，对机体细胞起保 光度为1时，相当于0．05mg／mL核酸，重复测定3次，并计算 护作用，在防御 自由基的毒性、抗衰老以及预防肿瘤和抗炎 平均值。 等方面起着重要的作用＆]。目前，羊胎盘肽的制备方法主要 核酸含量C=0．05×Azeo姗×样品稀释度，在公式中。c； 包括匀浆透析法和超滤法两种_3]。本文研制的羊胎盘肽是在 核酸质量浓度 (mg／mL) 刘月新 等人制备人胎盘免疫调节因子的基础上，采用组织 Azeo姗；核酸溶液在260rim处测得的吸光度 。⑥蛋白质 破碎、反复冻融等方法从健康山羊胎盘中提取的小分子多肽 定性反应；双缩脲反应；取样品2mL，加入同样体积双缩脲溶 物质，探索羊胎盘肽的提取条件 ，并对其部分理化性质进行 液C0．1g／mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．01g／mL的硫 了初步研究[5]。 酸铜溶液)，观察颜色变化。茚三酮定性反应 。取样品2mL，加 1 材料与方法 入同样体积0．2mol／L的茚三酮溶液观察颜色变化_1”。 1．1 主要试剂