不同检测方法检测免疫球蛋白轻链比值的比较.pdfVIP

垦堕 堕学杂志2012 4月第33卷第8期 ImJLabMed，April2012，Vo1．33，No．8 · 97l · · 检验技术与方法 · 不 同检测方法检测免疫球蛋 白轻链 比值 的比较 夏永泉 ，王 贤，张 葵 (南京大学医学院附属鼓楼 医院检验科 ，南京 210008) 摘 要：目的 比较流式细胞术法和散射比浊法的轻链 K／ 比值结果是否具有一致性 。方法 用流式细胞术法和散射 比浊 法分别对 32例患者的外周血 B淋 巴细胞膜上 K、轻链 的表达率、血清和尿液 中的游离K、轻链含量进行测定，并分别计算 K／ 比值 。结果 3个不同组别的标本 两两分组 ，分别进行检测 方法的一致性 比较 ，用Kappa检 验进行统计分析 ，结果为 B细胞 组和 血清组的K值为 0．881，血清组和尿液组的K值为0．885，B细胞组和尿液组的K值为 0．885。结论 两种检测方法结果的K／ 比 值有极高的一致性 。对于血清和尿液 中K／比值异常的标本 ，建议 同时检测 B淋 巴细胞膜上的 ／ 比值 ，以确定该标本是否有 B 淋 巴细胞克隆性表达 的存在 。 关键词 ：免疫球蛋 白； 轻链 比值 ； 流式细胞 术； 散射 比浊法 D0I：10．3969／j．issn．1673—4130．20l2．08．038 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673—4130(20l2)08—0971-01 通过对慢性淋巴细胞性 白血病及原发性 肾病综合征患者外 测定、血清和尿液 中免疫球蛋 白游离轻链 和 含量 的测定 ， 周血细胞膜上 、轻链表达率、血清及尿液 中的游离 、轻链 对所得数据进行处理 。B淋 巴细胞膜上 ／ 的参考范 围为 的检测 ，探讨不同检测方法结果中 ／比值是否具有一致性 。 1．O3～l_59，血清 中轻链 K／的参考范 围为 1．53～3．29，尿液 1 资料与方法 中轻链 ／的参考范围为 1．4O～2．76_l。]。本组将 K／值为正 1．1 一般资料 32例患者为 2009～2011年间该院住院的已 常的结果设为正常，低于参考范围的结果设为异常 I，高于参 确诊患者 ，其 中 12例为慢性淋 巴细胞性 白血病患者 ，男 2例 ， 考范围的结果设为异常 Ⅱ，并对分组数据进行 Kappa一致性 女 1O例，年龄 45～77岁，平均年龄 58．4岁；2O例慢性肾病患 检验 。见表 1～3。 者 ，男 12例 ，女 8例 ，年龄 34～71岁 ，平均年龄 47．3岁 。 表 1 B淋 巴细胞组和血清组 ／ 比值一致性的结果 比较 1．2 仪器与试剂 (1)美 国BeckmanCoulter公司 Immage特 种蛋 白仪 ，试 剂 为其原装试 剂 ： 轻链 检测试 剂盒 (批 号： 446440)，轻链检测试剂盒 (批号：446470)，稀释液、缓冲液、 标准品及质控品等均为该公司提供 的进 口配套试剂。(2)美 国 BD公司 FACSCalibur流式细胞仪 ，试剂为其原装试剂 ：BD OncomarkAnti—Kappa／Anti—Lambda／CD19Reagents(批 号 ： 44045)，IgGlb—FITC、IgG2a—PE、CD19-PerCP，鞘液 、溶血素及 表 2 血清组和尿液组 ／ 比值一致性的结果 比较 质控品等均为该公司提供 的进 口配套试剂 。 1．3 方法 1．3．1 散射 比浊法 血清及尿液 中的 、轻链 的测定按美 国 BeckmanCoulter公司 Immage特种蛋 白仪说明书进行操作 ， 采用散射 比浊法来检测轻链 、的含量 ，并计算 ／ 比值 。 1．3．2 流式细胞术法 外周血 B淋 巴细胞膜表面免疫球蛋 白轻链的测定：用 淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞 表 3 B淋 巴细胞组和尿液组 ／ 比值一致性的结果比较 (PBMCs)，以无菌生理盐水洗涤 3次，备用 。取 10 LAn