不同培养基中CIK的生物学特性及其对肿瘤细胞的杀伤效果.pdfVIP

· 52 · 误诊误治2012年 月第 鲞笙 塑 ig 望Y： !：箜： ：： · 肿瘤基础研究进展 · 不同培养基中CIK的生物学特性及其对肿瘤细胞的杀伤效果 徐 晗 ，张 斌 ，陈 虎 [摘要] 目的 比较健康人和肿瘤患者细胞因子诱导的杀伤细胞 (cytokine—inducedkiller，CIK)在淋巴细胞无血清 培养基及普通无血清培养基中的细胞形态、体外扩增速度 、细胞表型及其对肿瘤细胞株 的杀伤活性。方法 取健康人和 肿瘤患者外周血各 3例 ，经密度梯度离心获得外周血单个核细胞 (PBMC)，分别在淋 巴细胞无血清培养基及普通无血清 培养基中，加入基 因重组人干扰素 (rhIFN．)、抗人 CD3单克隆抗体 (OKT3)和基 因重组人 白细胞介素 2(rhIL一2)，体外 诱导 CIK细胞 ，比较细胞的形态 、扩增速度 、细胞表型及杀伤活性。结果 在不同培养基中健康人外周血 CIK细胞 的扩 增速度 、流式细胞学检测的 CD3 CD8 和 CD3 CD56 细胞百分 比以及对 K562和HL-60肿瘤细胞株 的杀伤活性均显著 高于肿瘤患者 ，差异有统计学意义 (P0．05)；两种来源的PBMC在不同的培养基 中经过诱导获得 的CIK细胞在增殖速 度 、流式细胞学分析结果及杀伤活性方面差异亦有统计学意义(P0．05)。结论 在不同的培养基 中肿瘤患者的PBMC 经诱导培养获得的CIK细胞可有显著差别，为临床进一步提高CIK细胞的治疗效果提供了实验依据。 [关键词] 细胞 因子类 ；培养基 ，无血清 ；杀伤细胞 ；生物医学研究 [中国图书资料分类号] R73—3 [文献标志码] A [文章编号] 1002—3429(2012)04-0052-04 [DOI] 10．3969／i．issn．1002—3429．2012．04．025 Research on BiologicalCharacteristicsandCytotoxicityofCIK CellsinDifferentCultureSystems XU Han ‘ ， ZHANG Bin ，CHENHu (1．GeneralHospitalofPLA ＆PostgraduateMedicalSchoolofPLA，Beijing100853， China；2．DepartmentofHematopoietieStem CellTransplantati0n，AffiliatedHospitaltoAcademyofMilitaryMedicalSciences， CellandGeneTherapyCenter，Beijing100071，China) [Abstract] objective Toobservethechangesinmorphology，phenotype，proliferationactivityandcytotoxicityofcyto— kineinducedkiller(CIK)cellswhichwereculturedinlymphocyticserum—freemediumoringeneralpurposeserum-fieemedium andfrom healthypeopleortumorpatients，andthentoinvestigatetheefficiencyofCIK cellsincancerimmunotherapy．M ethods Peripheralbloodmononuclearcells(PBMC)wereisolatedbydensitygradientcentrifugationderivedfrom threehealthysub— jeelsandthreetumorpatients，CIKcellsweregeneratedfromPBMCinlymphocyticserum—freemediumAorBandwereincuba— ted in vitrointhepresenceofIFN一 followedbyOKT3and IL一2．Proliferation，Morphology，phenotypes，and thecytotoxicity activitywerecompared．Results Theproliferationspeed，thepercentageofCD3 CD8 andCD