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南极假丝酵母脂肪酶A 的表面展示及酶学性质
微生物学通报 JUL 20, 2011, 38(7): 1070−1076
Microbiology China © 2011 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@
简 报
南极假丝酵母脂肪酶A 的表面展示及
酶学性质
*
严慧玲 蓝东明 王永华 杨博
(华南理工大学 轻工与食品学院 广东 广州 510640)
摘 要: 采用 a 凝集素作为载体蛋白, 首次将南极假丝酵母脂肪酶 A 展示在酿酒酵母细胞表面,
通过MD 平板筛选获得表面展示型的CALA 酵母工程菌株。免疫荧光检测显示CALA 被成功展示
在酵母细胞壁表面, 重组子经诱导后能在三丁酸甘油酯板上形成透明圈, 说明展示的 CALA 具有
活性。重组酵母在液体培养基培养72 h, 活性达到最高, 为80.4 U/g 干细胞。酿酒酵母展示的CALA
最适温度及pH 值为70 °C 和pH 8.0 。经50 °C 保温2 h, 仍含有60%水解酶活力。展示的CALA
在pH 7.0 和pH 8.0 溶液中比较稳定。经DMSO 处理2 h, 展示的 CALA 仍保持70%的活性。以上
结果表明酵母展示的CALA 可作为一种有潜质商业用途的全细胞催化剂。
关键词: 南极假丝酵母脂肪酶A, 酵母表面展示, 全细胞催化, 酶学性质
Cell surface display of Candida antarctica lipase A by
Saccharomyces cerevisiae and its practical properties
*
YAN Hui-Ling LAN Dong-Ming WANG Yong-Hua YANG Bo
(College of Light Industry and Food Science, South China University of Technology, Guangzhou, Guangdong 510640, China)
Abstract: Lipase A gene of Candida Antarctica (cala) was displayed for the first time on the surface of
Saccharomyces cerevisiae using a-agglutinin as an anchor protein, recombinant strains were screened
on minimal dextrose plates. Results of immunofluorescence microscopy assay revealed that the
CALA-a-agglutinin fusion proteins were successfully anchored on the S. cerevisiae cell surface. Fur-
thermore, yeast displayed CALA produced
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