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2017-07-14 发布于浙江
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用RedET重组酶构建基因打靶载体.pdf

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用RedET重组酶构建基因打靶载体

卷期生物工程学报 !! %’ (!! ) ( 年月 !## $$ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 )*+,-+. !## !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 用!#$ % 重组酶构建基因打靶载体 ’( )*+,-. /-0 1.2+304+,.4 56+-0 7-.8+096+,-.——— !#$ % !6-:;,.3+,-. $ ! ! ! $ ! 杨建岭，顾淑萍，陈臣，王铸钢，许燕，费俭 $ ! ! ! $ ! ，，，， H6)I 315AJ15= IK L?4AM15= ;NF) ;?+5 O6)I P?4AI5= QK H5 52 DFR 315 $ 上海师范大学生命与环境科学学院，上海 !##!ST ! 上海南方模式生物研究中心，上海 !#$!#S ，，， $ 3%4+*/5%$/ (- 6#- % +$7 89#*($5%$/ :0#%$0% :+$1+# ;(*5+, $#9%*#/2 :+$1+# !#$+ ，， ! :+$1+# =%%+*0 !%$/%* - (* .#(5(7%, *1+$#5 :+$1+# !#$+ 摘要基因敲除的小鼠模型是研究基因功能的一种重要资源。采用常规分子克隆的方法建立基因敲除的打靶载体存在构建效率低和难以获得长片段同源臂的缺点。因此快速高效地构建打靶载体，已成为获得特定基因敲除动物模型的关键环节。为研究=% 7$: 未知功能分泌肽基因，应用一种新的U)6 工程平台———/+2V F@ 同源重组技术来构建其打靶载体，并比较了这一方法在构建不同长度同源臂中的效率。研究表明，重组方法构建打靶载体具有很高的效率，可以获得较长的同源 /+2V F@ 臂，并且不会引入突变，有助于获得更高的打靶效率。因此/+2V F@ 重组为构建打靶载体提供了一种新的可靠的方法。关键词 /+2V F@ 重组，基因打靶，载体中图分类号文献标识码文章编号（） WX:! 6 $###AS#$ !## #A#C$CA# ’ ;8+036+ @?+ 8429 Y ?4,5 5+Z =+5+ Y450815 ? -+0,+ 5 150.+15=’9 081*+ 02+,10 Y1+’2 -10’’9 .+’915= 5 8?+ （） =+5+ [50[48 \] ,4+ ( @?+ 058.40815 Y 8.=+815= *+08. +05,10’’9 52 +YY101+58’9 ? 84.5+2 158 8?+ [+9 8+7 8 0^41.+ \] ,4+ -+04+ Y 8?+ ’Z +YY101+509 Y .+0,-15815 Z18? 8.21815’ 0