第14章RNA的生物合成-转录-WJ2.ppt

* 酶的诱导 调节基因 操纵基因 结构基因1 结构基因2 结构基因3 转录 翻译 酶1 酶2 酶3 有诱导物时 启动基因 大肠杆菌可以利用葡萄糖、乳糖、麦芽糖、阿拉伯糖等作为碳源而生长繁殖。 大肠杆菌在乳糖培养基中，代谢乳糖的酶增加，能够代谢乳糖。 在葡萄糖培养基生长时，不能代谢乳糖。 当培养基中有葡萄糖和乳糖时，细菌优先使用葡萄糖，当葡萄糖耗尽，细菌停止生长，经过短时间的适应，就能利用乳糖，细菌继续呈指数式繁殖增长。 （1）乳糖操纵子 i mRNA - β 半乳糖苷酶 透过酶 转乙酰基酶 i p z y a o mRNA 启动基因 操纵基因 结构基因 调节基因 乳糖操纵子的结构 z、y、a是功能相关的结构基因，为细菌利用乳糖所必需 只有葡萄糖时（负调控、阴性调控） CAP受体蛋白 阻遏蛋白结合在操纵基因上使转录不能进行 只有乳糖时 mRNA 诱导物乳糖与阻遏蛋白结合使之失活,转录能够进行 葡萄糖和乳糖均存在（阳性调控） 细菌中有一种能与cAMP特异结合的降解物基因活性蛋白CAP，也叫cAMP受体蛋白。当cAMP浓度较高时， CAP先与cAMP结合，然后与启动基因结合，促进RNA聚合酶与启动基因结合进行转录。 cAMP含量与葡萄糖的分解有关，当细菌利用葡萄糖分解供能时，cAMP生成少而分解多；cAMP含量低；当环境中无葡萄糖时，cAMP含量升高。 CAP-降解物基因活性蛋白 有葡萄糖存在：cAMP↓→cAMP - CAP复合物↓，不能结合启动子促进RNA 聚合酶的转录，→基因不能表达。 无葡萄糖存在：cAMP↑→cAMP – CAP复合物↑→正调控作用↑→基因表达。 乳糖操纵子的双向调节 （2）色氨酸Trp 操纵子 含有大肠杆菌合成色氨酸所需酶的结构基因。 属于可阻遏调控类型 色氨酸可作为辅阻遏物，与辅阻遏蛋白结合，成为能与操纵基因结合的阻遏蛋白，抑制转录进行。 辅阻遏蛋白 操纵基因 结构基因 调节基因 mRNA 酶蛋白 酶代谢产物一旦大量积累 衰减子(Attenuator): 位于结构基因起始密码子前，能够终止 和减弱转录作用，这段序列称为前导序列。 衰减作用(attenuation) 1984年Mizuno等发现一种与mRNA互补 的RNA。 它与mRNA结合，阻断mRNA翻译，从 而调节基因表达,　称为反义RNA，亦称为干扰mRNA的互补RNA（micRNA）。 （３）翻译水平的调节　　　　　——反义RNA的调节 可能的机制 （1）和靶核苷酸序列形成双链区，直接 阻碍其翻译的起始。 （2）在靶分子的部分区域形成双链区， 改变其构象，直接影响其功能。 反义RNA的应用 具有高度的特异性，一种反义RNA抑制一 种mRNA。 可人工设计合成反义RNA，抑制靶基因的 表达，从而达到治疗疾病的目的，即基因治 疗。如乙肝病毒、爱滋病病毒（HIV）等都是 单链RNA病毒，可利用反义RNA抑制其在体内 的复制。可用反义RNA抑制癌蛋白的表达。 3. 真核生物基因表达的调控 真核生物的基因结构复杂。 真核基因调控以利用激活物的正调控为主。 转录涉及一套转录因子（调控序列与基因调节蛋白）的参与。 真核染色体DNA处于转录抑制状态，组蛋白乙酰化，磷酸化，CpG的脱甲基使其转录去阻抑。 转录和翻译在时空上是分开的。 真核基因表达调控环节 转录水平的调节 转录水平的调节是真核生物基因 表达调节中最重要的环节。 主要通过顺式作用元件和反式作 用因子相互作用来完成。 顺式作用元件（Cis-acting element） 对基因表达有调节活性的DNA序列， 其活性只影响与其自身处在同一个DNA 分子上的基因，多位于基因旁侧或内含子 内，不编码蛋白质。 ① 启动子（promoter） ② 增强子（enhancer） ③ 静息子（silencer） 顺式作用元件主要有： 真核启动子 真核启动子一般包括转录起始点及其上游约100~200bp序列，包含有若干具有独立功能的元件，其元件可分为两种: 核心启动子元件：指RNA聚合酶起始转录所必需的最小的DNA序列，包括转录起始点及其上游-25/-30bp处的TATA盒。核心元件决定转录起始位点和产生基础水平的转录。 上游启动子元件：包括通常位于-70bp附近的CAAT盒和GC盒、以及距转录起始点更远的上游元件。这些元件与相应的蛋白因子结合能提高或改变转录效率。不同基因具有不同的上游启动子元件，其位置也不相同。 增强子