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苯胺类化合物的遗传毒性及其定量构效关系 发表：(2007-04-09 09:34);? 最后修改:2007-04-09 09:34;? 作者：;? 【阅读：51】? 【留言繁體 苯胺类化合物的遗传毒性及其定量构效关系 卫生毒理学杂志 2000年第4期第14卷 实验研究 作者：赵晓红　牛静萍　李兴玉　王勋陵 单位：牛静萍　李兴玉（兰州医学院）；赵晓红　王勋陵（兰州大学生命科学学院，730000） 　　苯胺类化合物的应用十分广泛，加之新合成化合物不断增加，结构趋于复杂，环境污染日趋严重。近年来虽对苯胺类化合物的毒性已进行了一些研究，但仍有许多生产中应用极为广泛的化合物未进行毒理学研究。现检测了15种苯胺类化合物的遗传毒性，并用定量构效关系研究此类化合物的结构及理化性质与反映DNA损伤作用大小的诱导比率间的定量关系，以推断其毒作用机制，预测新合成的同源物的遗传毒性。 　　1　材料与方法 　　1.1　实验菌株　采用TA1535/psk1002菌株，其对接触外源性物质造成的DNA损伤，通过SOS反应网络具有β-半乳糖苷酶诱导作用，根据酶活性的诱导值，可判断受试物是否具有遗传毒作用［1］。 　　1.2　受试物　选15种有代表性的苯胺类化合物苯胺(AP)、邻甲苯胺(AP)、间甲苯胺(CP)、对甲苯胺(AP)、邻氯苯胺(CP)、间溴苯胺(CP)、邻硝基苯胺(CP)、间硝基苯胺(CP)、对硝基苯胺(CP)、N，N-二甲基苯胺(CP)、N-乙基苯胺(AP)、对苯二胺(LR)、2，4-二硝基苯胺(AP)、2，6-二氯苯胺(CP)和4-N，N-二甲氨基苯胺(AP)。以上化合物均购自化学试剂商店。 　　1.3　操作方法及评价指标　SOS/umu测试方法参见文献［1］。测试并计算出各受试物的β-半乳糖苷酶诱导活性(IU)，诱导比率(R)=测试管IU值/阴性对照管IU值。R＞2.0时，结果为阳性。 　　1.4　受试物参数计算方法　取代基引起化合物分子理化性质变化的指标有疏水效应参数(π)、场诱导效应参数(F)、共轭效应参数(R)和空间效应参数(Es)，计算受试物中各取代参数之和，表示受试物全部取代基某效应的贡献［3，4］。 　　1.5　拓扑学指数的计算　拓扑学方法以拓扑图论为基础，将分子结构变换成拓扑图，借助分子描述符x(chi)，以数的形式把分子的原子组成和排列方式定量地表示出来，进而从本质上反映分子的多种理化性质，最后把化合物分子的加合性和构成的结构信息译制出来。分子连接性指数(mxvt)表示阶为m的t类型子图的价分子的电子概率指数；分子负熵(I)表示化合物的电子概率场中所含信息量，这两个指标是最常用的拓扑学指数［5，6］。 　　1.6　QSAR模式的建立　将15种苯胺类化合物umu测试所得最高剂量组(+S9)的诱导比率R作为因变量，以苯胺为基本结构，选择18种理论参数为自变量，进行多元逐步回归分析，确定最优定量构效关系式，同时筛选出与遗传毒性最为密切的理论参数。 　　2　结果与分析 　　2.1　苯胺类化合物SOS/umu测试结果　15种化合物中除苯胺、邻甲苯胺为阴性外，其他的R值不论体外代谢活化系统是否存在都大于2.0，且有良好的剂量反应关系。所测R值除苯二胺、4-N，N-二甲氨基苯胺不加S9高于加S9外，其余均为加S9时为高。其中R＞20的有2，6-二氯苯胺、对硝基苯胺、间硝基苯胺和邻硝基苯，R在10～15的有对苯二胺和2，4-二硝基苯胺；R在2～8之间的化合物由大到小依次为邻氯苯胺、对甲苯胺、4-N，N-二甲氨基苯胺、N-乙苯胺、间溴苯胺、间甲苯胺和N，N-二甲基苯胺(表1)。 　　2.2　理论参数计算结果　按公式［3～6］分别计算的化合物的理化参数和拓扑学指数结果见表2。 　　2.3　QSAR分析　应用MCSAS软件进行多元逐步回归分析，筛选出3个方程列于表3。分析这3个方程，方程(1)的R2为0.0758，相关性很差，说明单一的拓扑学指数对此类化合物诱导比率的影响不明显，故弃去。方程(2)和(3)的复相关系数均较高，说明这些参数与R值之间相关程度高，从分析可知场诱导效应是影响R值的主要因素，偏相关系数＞0.6，其次为Σπ、(ΣEs)2、ΣEs、4xvpc、(ΣF)2和3xvc分子连接性指数影响较小，分子负熵无影响。由此证明影响苯胺类化合物的主要因素为理化参数，拟选方程(2)和(3)为此类化合物的QSAR方程。 　　2.4　预测效果比较　将15种化合物与遗传毒性关系密切的理论参数值回代入方程(2)和(3)中，计算理论诱导比率，见表4，比较计算值与实测值，方程(3)相差较小(P＞0.05)，因此可选为最优方程。 　　3　讨论 　　实验结果表明SOS显色法监测苯胺类化合物的遗传毒性是有效的，且此类化合物的DNA损伤作用经代谢活化而增强。化合