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@2第二章培养基与制备
第二章;培养基组成;一、基本营养源
1、碳源
凡可提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源及合成菌体和产物所必需的碳骨架成分的营养物质。
常用的碳源有:
糖类、油脂、有机酸和低碳醇等
;工业上常用的糖类;③ 淀粉、糊精;
油脂类:
能利用这类碳源的M一般都有比较活跃的脂肪酶。M利用这类碳源时所消耗的溶解氧会增加,当供氧不足时,会引起pH下降。
常用的油脂类有:各种动、植物油,豆油、菜籽油、棉籽油、鱼油、猪油等。; 有机酸
有机酸的利用常会引起发酵体系pH上升,尤其是有机酸盐氧化时,常伴随有碱性物质的产生,使pH进一步上升。
常用的有机酸有:乳酸、醋酸、柠檬酸等。
; 烃和低碳醇类
正烷烃已经用于有机酸、氨基酸、抗生素、维生素和酶制剂发酵中,甘油也常用作抗生素生产和甾体转化的碳源。;2、氮源:凡可构成M细胞和代谢产物中氮素
来源的物质。
常用的氮源分两大类:有机氮源和无机氮源。
(1)无机氮源
种类:氨盐、硝酸盐和氨水
特点:微生物对它们的吸收快,所以也称之谓速
效氮源。但无机氮源的迅速利用会引起pH
的变化
(NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4
NaNO3 + 4H2 → NH3 + 2H2O + NaOH ;(2)有机氮源
来源:工业上常用的有机氮源都是一些廉价的原料,花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟
有机氮源成分复杂,除提供丰富的Pr.、aa.外,还含糖类、脂肪、无机盐及生长因子。由于有机氮源营养丰富,M在含有机氮源的培养基中表现出生长旺盛、菌丝浓度迅速增加等特点。;;例A:铁离子
青霉素发酵中,铁离子的浓度要小于20μg/ml
发酵罐必须进行表面处理;5.生长因子;前体指某些化合物加入到发酵培养基中,能直接被微生物在生物合成过程中合成到产物分子中去,而其自身的结构并没有多大变化,但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。;e.g. 青霉素发酵中加玉米浆发酵单位由20U/mL提高到40U/mL 。
玉米浆中含有苯乙胺,它被优先结合到青霉素分子中去,从而提高产量。
有些前体物质,例如苯乙酸、丙酸等浓度过高时,对菌体会产生毒性。有些菌体还有将前体氧化分解的能力。
在生产中常采用少量多次地加入前体。
总的加入量可按一个产物分子,进入几个前体分子,按等摩尔计算前体加入量,在总的加入量中,还应考虑菌体氧化、分解的那部分前体。;用量:前体的用量可以按分子量衡算,具体使用有个转化
率的问题; 产物 前体 产物 前体 ;
促进剂(promoter):既不是营养物,又不是前体,却能提高产量的添加剂。
巴比妥盐能使利福霉素单位增加,并能使链霉素生产菌自溶推迟,延长产物的分泌期。
酵母甘露聚糖可诱导 -甘露糖酶的产生,促使甘露糖链霉素转化为链霉素(streptomycin)。
聚乙烯醇衍生物可防止菌丝结球,提高糖化酶(saccharifying enzyme)的产量。
表面活性剂(surface active agent) :在底物和产物均不溶或微溶于水的发酵中,表面活性剂有增加渗透性(perviousness)、促使固体物分散从而强化传质和传氧的作用。
; 抑制剂(inhibitor): 在发酵过程中能产生抑制作用的物质;抑制剂(inhibitor):;1、按状态;2、按来源(纯度) ;3、按培养基的用途划分;TEXT;4、按目的(从发酵生产应用考虑)
孢子(斜面)培养基
种子培养基
发酵培养基;孢子培养基;种子培养基;发酵培养基;能够满足生产菌生长、代谢需要
目的代谢产物的产量最高
利于提高培养基和产物的浓度以提高生产能力
利于提高产物合成的速度,缩短发酵周期
减少副产物的形成便于分离纯化
原料低廉,质量稳定,取材容易
原料减少对通气搅拌的影响,提高氧利用率,降能耗
来源广泛且供应充足
利于产品分离纯化,减少产生三废物质
废物的综合利用能力强且容易处理;提供必要的营养成分
配制合适的浓度
主成分和其他成分的配比
控制合适的pH
添加有关前体物质和诱导物
阻遏物或抑制剂的影响
金属离子的影响
;㈠、培养基成分的选择原则;③ 当培养基成分确定后,剩下的问题就是各成分最适
的浓度,由于培养基成分很多,为减
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