中华人民共和国国家标准牛冷冻精液CB4143—84.PDFVIP

附录 3 中华人民共和国国家标准 牛冷冻精液 CB 4143—84 本标准适用于奶牛、兼用牛、肉牛和黄牛的冷冻精液产品。 1．规格与质量 1．1 剂型 细管、颗粒和安瓿 1．2 剂量 a．细管：中型 0．5mL；微型 0．25mL。 b．颗粒 0．1±0．OlmL。 c．安瓿 0．5mL。 1．3 精子活力 解冻后的活力，指呈直线前进运动的精子百分率(下限)30％(即 0．3)；精于复苏率(下限)50％。 1．4 每一剂量解冻后呈直线前进运动的精子数 细管：每支(下限)1 000 万个。 颗粒：每粒(下限)1 200 万个。 安瓿：每支(下限)1500 万个。 1．5 解冻后的精于畸形率(上限)20％。 1．6 解冻后的精子顶体完整率(下限)40％。 1．7 解冻后的精液无病原性微生物，每毫升中细菌菌落数(上限)1 000 个。 1．8 解冻后的精子存活时间 在 5～8℃贮存时(下限)为 12h；在 37℃贮存时(下限)4h。 牛冷冻精液(以下简称“冻精”)，必须符合上述各项指标。否则，不得使用。 2．制作程序 2．1 采精 2．1．1 种公牛的质量 用于制作冻精的种公牛，其体型外貌和生产性能，均应合乎本品种的种用公牛特等、一等标准。在目 前尚未建立国营种畜后裔测定站的地区，主力公牛必须经过种畜繁育场，进行后裔测定，由省、市、自治 区级畜牧科研部门把关，未经后裔测定的种公牛的冻精，必须经上级主管部门审批，严格控制使用。 2．1．2 种公牛的体质 种公牛必须体质健壮，新引进的公牛，应在隔离场所经过检疫。种公牛须经正式兽医机构和兽医师证 明，无下列传染病者，如牛肺疫、布鲁氏杆菌病、牛结核病、牛副结核病、牛白血病、钩端螺旋体病、传 染性鼻气管炎、病毒性腹泻病、胎儿弧菌和阴道滴虫症等，才允许使用。 上述各种疫病的检查方法，可按中华人民共和国农牧渔业部颁布的有关规定执行。 2．1．3 成年种公牛每周采精两次；每次也可根据具体情况和需要，连续排精两回。采精前，应先 用温水洗公牛阴筒和包皮，然后再用灭菌生理盐水冲洗干净。 2．1．4 种公牛的新鲜精液，应符合下列质量标准。不具备其中任何一项者，不得用于制作冻精。 a．新鲜精液的色泽应呈乳白稍带黄色。 b．直线前进运动精子(下限)60％。 c．精子密度每毫升(下限)6．0 亿。 d．精子畸形率(上限)15％。 2．2 精液的稀释 2．2．1 稀释保护剂的配制。 2．2．1．1 配制冻精用的稀释保护剂，必须用新鲜的双重蒸馏水和卵黄，二级品以上的化学试剂。 2．2．1．2 所用器具，必须达到牛冷冻精液人工授精技术操作规程的标准，保证清洁、无菌。 2．2．1．3 推荐下列配方，作为冻精用稀释保护剂。 a．细管用： 第一液 蒸馏水 lOOmL，柠檬酸钠 2．97g，卵黄 lOmL。 第二液 取第一液 41．75mL，加入果糖 2．5 克，甘油 7mL。 脱指奶 82mL，卵黄 lOmL，甘油 8mL。 b．颗粒用： 12％蔗糖液 75mL，卵黄 20mL，甘油 5mL。 12％乳糖液 75mL，卵黄 20mL，甘油 5mL。 2．9％柠檬酸钠液 73mL，卵黄 20mL，甘油 7mL。 c．安瓿用： 可参照以上各种配方酌情使用。 上述各类稀释保护剂，在每 lOOmL 中，应加青霉素、链霉素各 5～10 万 U。 稀释保护剂要现配现用；亦可配后放人 4～5℃冰箱中备用，但不应超过一周。 2．2．2 稀释比例 不做具体规定，但必须保证每一剂量(细管、颗粒、安瓿)中，解冻后所含直线前进运动精子数的规定。 2．3 降温和平衡(预冷) 稀释后的精液，采用逐渐降温法。在 1～1．5h 内，使稀释精液的温度降到 4～5℃；然后再在同温的 恒温容器内平衡 2～4h。 2．4 冷冻