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· · 第二十六章 酶促反应法测定生物化学物质 　 458 第二节 脱氢酶指示系统测定法 　 。 脱氢酶指示系统是最常用的测定生化物质的方法之一 体内许多生化物质可以直接或间接 , , 地在脱氢酶的催化下发生氧化还原反应 这其中需要辅酶参与 在氧化时待测物脱下的氢交给了 , ; , 氧化型辅酶 使其转变为还原型辅酶 在还原时待测物需要的氢由还原型辅酶提供 使其转化为 , , ( ) ( ) 氧化型辅酶 由此即可根据其在 处吸光度的变化 计算以 或 为辅酶 340nm NAD H NADPH 。 的酶促反应中待测物的浓度 该类方法最大的缺点是血浆中有许多以 NADH为辅酶的脱氢 , , 。 酶 采用 NADH进行反应时易发生负反应 干扰测定 为解决这种情况常加入高浓度的丙酮酸 ; ; 抑制以LDH为主的内源性脱氢酶的干扰 也可使用双试剂法来消除干扰 并且所使用的试剂酶 中的杂酶应低于允许限。 、 一 单酶反应直接测定法 , , 。 待测物若可直接发生脱氢酶反应 并产生可检测的信号 称为单酶反应直接测定法 它是最 简单的脱氢酶指示系统测定法。 ( ) 一 血液乳酸与丙酮酸 测定方 、 。 1. 法概述 血液乳酸测定的方法有乳酸氧化酶法 酶电极法和乳酸脱氢酶法 乳酸 　 , 氧化酶法是根据乳酸在乳酸氧化酶催化下氧化生成丙酮酸和 HO 后者参与Trinder反应生成 2 2 。 , 、 , 。 醌亚胺色素 氧化酶法无需制备无蛋白滤液 操作简便 快速 适宜常规应用 酶电极法是利用 , , 乳酸氧化酶催化产物 HO 经铂电极催化电离并在铂 银电极间形成微电位差和微电流 其强 2 2 。 、 、 , 、 , 度与乳酸浓度成正比 酶电极法快速 简便 准确 适合于床旁 出诊及运动医学中的测定 但该 。 。 检测需要专用仪器 血液丙酮酸的酶法测定主要包括乳酸脱氢酶法和丙酮酸氧化酶法 丙酮酸 , 。 氧化酶法由于特异性不高 易受到许多还原性物质的干扰而影响结果的准确性 临床血液乳酸