甜菜碱对小鼠成纤维细胞的影响-liu.ppt

甜菜碱对小鼠成纤维细胞的影响 汇报人： 宋娴 指导老师：刘长青 小组成员：宋娴、赵世华、白天、王坡 吕玉伟、 陶良波、丁伟 一、研究背景： 甜菜碱是一种广泛存在于动植物体内的天然化合物，以甜菜制糖后的糖蜜中含量最高，广泛应用于食品、化学试剂和化工原料等领域。随着人们对甜菜碱功效研究的不断深入，发现甜菜碱具有促进生长、改善胴体品质的功效 同时发现甜菜碱具有抗氧化的功能，许多日化公司利用它的此项性质开发化妆品，如派蕾的化妆品中就含甜菜碱 二、立题依据 甜菜碱在调控细胞生长、增殖、分化以及抗衰老、抗凋亡机制等仍不清楚，目前还没有甜菜碱对小鼠成纤维细胞影响的报道。 可用噻唑蓝法 （MTT）来评价物质对细胞的毒性 三、研究目的 3、探究甜菜碱对细胞是否有毒性，并找出其对细胞生长影响的安全范围 四、拟解决关键问题 3、探究甜菜碱过量后对细胞是否有毒性，并找出其对细胞生长影响的安全范围 五、研究内容和方法 1、小鼠皮肤成纤维细胞的培养，获得细胞悬液 2、实验分六组进行培养，甜菜碱原料终浓度分别达到 0.00、0.10、1.00、5.00、20.00、100.00μg/ml ,每组再分四个时间梯度分别为1、2、3、4天以测定功效成分甜菜碱原料的毒性 3、用噻唑蓝法(MTT) 得到细胞相对增值率来评价甜菜碱 的细胞毒性 4、取细胞悬液进行SOD的活性测定。 六、技术路线 胎鼠细胞培养 七、预期结果 1、低浓度组的细胞增殖率较高 2、一定浓度下SOD检测活性增加 3、超过一定浓度，细胞增殖率下降 八、经费预算 八、参考文献 【1?】方希修，王冬梅，李继秋.甜菜碱的营养生理功能与应用.中国饲料，2001，（6）：22-23 【2】王　昕等1MTT 法评价医用高分子材料的细胞毒性. 山东生物医学工程. (2003) 01 【3】程树军,邹志飞,黄纫. 化妆品毒性检验壁垒性替代技术的研究进展. 中国比较医学杂志,2006 ,16 :3792382 【4】林祥海,王建峰,梅琳,等. 用人角质细胞评价4 种化妆品的细胞毒性. 毒理学杂志,2008 ,22 :75276. 【5】程艳, 董益阳, 王超, 等. 化妆品过敏的检测和评价[ J] . 卫生研究, 2006, 35( 6 ): 811- 813 【6】张黎,欧阳五庆,余欣,等. 玉米幼芽提取物对小鼠皮肤成纤维细胞体外抗氧化能力的影响. 西北农林科技大学学报(自然科学版) ,2006 ,34 :125. 【7】 苗明三. 氧自由基疾病与抗氧化中药[ J]. 河南中医药学刊, 2002, 17 ( 4): 1- 3. 【8】冯家斌, 阮国良, 杨代勤. 不同剂量甜菜碱对黄鳝存活、生长和免疫能力的影响[ J] . 饲料工业, 2006( 14) : 27. 【9】季宇彬，高世勇等甜菜碱促进小鼠脾淋巴细胞增殖作用的钙通道机制研究。中国中药杂志，2009,34（15） * 1、甜菜碱对小鼠成纤维细胞增殖率的影响 2、甜菜碱对小鼠细胞SOD活性影响,明确甜菜碱是否通过调节SOD活性延缓细胞衰老，促进细胞增殖 1、探讨不能浓度的甜菜碱对小鼠成纤维细胞增殖率的影响，确定一个促进细胞增殖的最佳浓度 2、甜菜碱作用后，检测SOD活性影响,明确甜菜碱是否通过调节SOD活性延缓细胞衰老 配制成细胞悬液，分组培养 分成六组浓度梯度 SOD活性检测 细胞毒性检测 细胞增值率 同时每组分四个时间梯度 细胞形态学观察 数据分析得出结论 主要仪器