干细胞标志lgr5在糖尿病小鼠小肠上皮中的表达 - 新医学.pdf

新医学２０１５年５月第４６卷第５期 ２８９ 基础研究论著 干细胞标志 Ｌｇｒ５在糖尿病小鼠小肠上皮中的表达 钟献阳　于涛　黎洁瑶　杨洪生　欧阳慧　陈其奎 　　 【摘要】　目的　探讨糖尿病小鼠小肠上皮干细胞标志分子Ｇ蛋白偶联受体５（Ｌｇｒ５）的表达及 干细胞数量的改变情况。方法　采用链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病小鼠模型，用免疫组织化 学检查 （免疫组化）检测糖尿病小鼠 （６只）与正常小鼠 （６只）小肠上皮组织中Ｌｇｒ５的表达，并 分离糖尿病小鼠与正常小鼠原代小肠上皮细胞，采用流式细胞技术测定Ｌｇｒ５阳性细胞在上皮细胞中 的比例。结果　免疫组化结果显示糖尿病与正常小鼠小肠上皮每个隐窝单位的Ｌｇｒ５阳性细胞数量分 别为 （３７±０５）个及 （１５±０６）个，两者比较差异有统计学意义 （Ｐ＜００５）。流式细胞技术测 得糖尿病与正常小鼠小肠上皮Ｌｇｒ５阳性细胞比例分别为 （２８７５±３６９）％及 （６５５±１７８）％，前者 上皮组织中Ｌｇｒ５阳性细胞比例显著高于后者 （Ｐ＜００５）。结论　链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠小肠 上皮Ｌｇｒ５阳性干细胞数量增加，Ｌｇｒ５在糖尿病小鼠小肠上皮细胞高表达。 　　 【关键词】　Ｇ蛋白偶联受体５；糖尿病；小肠上皮干细胞；原代细胞分离 ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｓｔｅｍｃｅｌｌｍａｒｋｅｒＬｇｒ５ｉｎｔｈｅｓｍａｌｌｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍｏｆｄｉａｂｅｔｉｃｍｉｃｅ　ＺｈｏｎｇＸｉａｎ ｙａｎｇ，ＹｕＴａｏ，ＬｉＪｉｅｙａｏ，ＹａｎｇＨｏｎｇｓｈｅｎｇ，ＯｕｙａｎｇＨｕｉ，ＣｈｅｎＱｉｋｕｉＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，Ｓｕｎ ＹａｔｓｅｎＭｅｍｏｒｉａｌＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｕｎＹａｔｓｅｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０１２０，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ，ＹｕＴａｏ，Ｅｍａｉｌ：ｙｕｔａｏ２０１４＠１２６ｃｏｍ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｍｅａｓｕｒｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｓｔｅｍｃｅｌｌｍａｒｋｅｒｌｅｕｃｉｎｅｒｉｃｈｒｅｐｅａｔｃｏｎｔａｉ ｎｉｎｇＧｐｒｏｔｅｉｎｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ５（Ｌｇｒ５）ｉｎｔｈｅｓｍａｌｌｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｉｎｔｈｅ ｑｕａｎｔｉｔｙｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅｄｉａｂｅｔｉｃｍｉｃｅＭｅｔｈｏｄｓ　Ｄｉａｂｅｔｉｃｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ（ＳＴＺ）ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＬｇｒ５ｉｎｓｍａｌｌｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｔｉｓｓｕｅｓｏｆｔｈｅｄｉａ ｂｅｔｉｃ（ｎ＝６）ａｎｄｎｏｒｍａｌｍｉｃｅ（ｎ＝６）ｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙＰｒｉｍａｒｙｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｄｉａｂｅｔｉｃａｎｄｎｏｒｍａｌｍｉｃｅａｎｄｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆＬｇｒ５ｐｏｓｉｔｉｖｅｃｅｌｌｓａｍｏｎｇｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙＲｅｓｕｌｔｓ　Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｔｈｅｑｕａｎｔｉｔｙｏｆ Ｌｇｒ５ｐｏｓｉｔｉｖｅｃｅｌｌｓｐｅｒｃｒｙｐｔｉｎｔｈｅｄｉａｂｅｔｉｃａｎｄｎｏｒｍａｌｍｉｃｅｗａｓ（３７±０５）ａｎｄ（１５±０６）ｗｉｔｈｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ（Ｐ＜００５）ＦｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆＬｇｒ５ｐｏｓｉｔｉｖｅｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉ ｎａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｏｆｔｈｅｄｉａｂｅｔｉｃｍｉｃｅｗａｓ（２８７５±３６９）％，ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈ（６５５± １７８）％ ｏｆｔｈｅｎｏｒｍａｌｍｉｃｅ（Ｐ＜００５）