小鼠犉狔状 - 畜牧兽医学报.pdf

畜牧兽医学报 ， （）： ２０１３４４４ ６３５６４１ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 小鼠犉狀及其多种突变体的载体构建和 狔 蛋白生物活性预测分析 安 磊，黄映雪，胡新德，张 伟，闫宇华，陈树林，赵善廷 　 　 （西北农林科技大学动物医学院，杨凌 ７１２１００） 摘 要：旨在构建小鼠犉狀及其多种突变体真核表达载体，预测突变后的蛋白质二级结构和功能改变。克隆小鼠 　 狔 大脑皮质的 基因，构建克隆质粒 ｗｔ，经测序验证后，以 ｗｔ为模板，针对不同突变位 犉狀 ｐＭＤ１８Ｔ犉狀 ｐＭＤ１８Ｔ犉狀 狔 狔 狔 点设计引物，构建不同突变体克隆质粒并验证，将 犉狀不同的突变体克隆至真核表达载体 ｐＣＡＧＭＣＳ，构建真核 狔 表达载体 ｐＣＡＧＭＣＳ犉狀 ，将表达载体转染细胞进行检测，并对其进行生物信息学分析。测序结果显示 狔 ｗｔ核苷酸序列正确率 ，突变体完全达到预期设计； 转染细胞后 表达 ＭＤ１８Ｔ犉狀 １００％ ＣＡＧＭＣＳ犉狀 Ｆｎ ｐ 狔 ｐ 狔 ｙ 量明显升高（ ）。结果表明， 突变体蛋白质的二级结构与野型相比有很大改变，可能影响其生物活性。 犘 ０．０１ Ｆｎ ＜ ｙ 关键词： ；载体构建；突变体；生物活性 犉狀 狔 中图分类号： 文献标志码： 文章编号： （ ） Ｑ７８ Ａ ０３６６６９６４２０１３０４０６３５０７ 　　　　 　　　　 犆狅狀狊狋狉狌犮狋犻狅狀狅犳犞犲犮狋狅狉狊狑犻狋犺犕狅狌狊犲犉狀犪狀犱犐狋狊犇犻犳犳犲狉犲狀狋犕狌狋犪狀狋狊犪狀犱犉狌狀犮狋犻狅狀犪犾 狔 犘狉犲犱犻犮狋犻狅狀犃狀犪犾狊犻狊狅犳犜犺犲犻狉犘狉狅狋犲犻狀犘狉狅犱狌犮狋狊 狔 ， ， ， ， ， ＡＮＬｅｉＨＵＡＮＧＹｉｎｘｕｅ ＨＵＸｉｎｄｅＺＨＡＮＧＷｅｉＹＡＮＹｕｈｕａ ｇ  ， ＣＨＥＮＳｈｕｌｉｎ ＺＨＡＯＳｈａｎｔｉｎｇ （ ， ， ， ） 犆狅犾犾犲犲狅 犞犲狋犲狉犻狀犪狉 犕犲犱犻犮犻狀犲 犖狅狉狋犺狑犲狊狋犃牔犉犝狀犻狏犲狉狊犻狋 犢犪狀犾犻狀 ７１２１００犆犺犻狀犪 犵 犳 狔