第五节酶激活和酶抑制测定法.pdf

第五节 酶激活和酶抑制测定法 · · 　 477 第五节 酶激活和酶抑制测定法 　 , 、 在酶促反应的过程中 某些酶必须在一些无机离子 微量元素或辅基存在时才能发挥其催化 , 、 。 活性 这些必需的无机离子 微量元素或辅基即为该酶的激活剂 当脱去这些酶中关键的无机离 、 , 。 , 子 微量元素或辅基时 酶即失去了其催化活性 当这些无活性的酶与标本混合后 标本中的无 、 , , 机离子 微量元素或辅基可使该酶重新具有活性 并催化反应进行 复活的比例可以反映这些无 、 。 , 、 , 机离子 微量元素或辅基的含量 因此利用该特点 即可检测这些无机离子 微量元素或辅酶 该 。 、 方法也称为酶活性恢复测定法 除了利用标本中的无机离子 微量元素或辅基可使该酶重新具 , , 有活性而进行检测的酶激活剂法 临床实验室检测中还利用一些物质可以抑制酶的活性 根据抑 , 。 制酶的活性程度来进行检测其抑制物浓度的酶抑制法 如有机磷的检测 , 。 目前 酶激活法主要用于体内无机离子与微量元素的测定 酶抑制法主要用于有机磷的 检测。 、 一 无机离子 无机离子的检测在临床应用较多的 、 、 、 、 、 。 , 、 、 主要有钾 钠 氯 钙 磷 镁等 其中 钾 钠 氯的测定方 ; 、 、 法已在第 章电解质分析仪中叙述 钙 磷 镁的测定方法已在第 章化学法测定生化物质中 28 22 ; 。 叙述 这里主要介绍其酶法测定的方法 ( ) 一 测定原理 , 丙酮酸激酶法测定钾离子 酶法测定钾离子是近年来开始研究的一种方法 它主要根据 1. 　 ( ) , 磷酸烯醇式丙酮酸和 ADP在丙酮酸激酶 PK 的催化下可生成丙酮酸和 ATP丙酮酸又与 + , , LDH系统偶联 经 LDH催化生成乳酸的同时NADH氧化成 NAD 钾离子的存在可使 PK活 ,