溶菌酶基因表现之调控机制.pdf

中中中中中中中中 溶菌酶基因表現之調控機制 黃黃黃(1) 陳陳陳(1) 黃黃黃(2)(3) 摘要：溶菌酶是一種在原核、真核生物均中表現的酵素，其功能在分解細菌的細 胞壁，可以幫助宿主對抗細菌的感染。溶菌酶主要表現在髓系（myeloid lineages ） 及輸卵管細胞中，是具有組織專一性表現的基因。溶菌酶基因中隨著髓系細胞自然 分化的過程由低表現到大量表現。在活體外，髓系細胞可經由phorbol 12-myristate 13-acetate （PMA ）刺激成為單核球，進一步被細菌內毒素活性根源的脂多醣 （lipopolysaccharide,LPS ）刺激成為巨噬細胞，此時巨噬細胞之溶菌酶基因也中大 量表現，而製造出溶菌酶。溶菌酶基因的表現中隨著髓系細胞的分化，逐步受到調 控。溶菌酶基因在巨噬細胞的大量表現，需有調控序列及轉錄因子參與調控。調控 序列包含啟動子與-6.1 kb E 、-3.9 kb E 、-2.7 kb E 加強子以及-2.4 kb的靜默子。NF-I （nuclear factor I ）、CBP因子（cyclic AMP response element binding protein ）、SP1 （specific protein 1 ）、C/EBP （CCAAT/enhancer-binding proteins ）、PU.1 （purine-rich box binding protein, also called SPI1 ）均為重要的轉錄因子。溶菌酶基因表現的調控 是探討基因調控極佳的模式。本文就前人及相關研究結果進行綜合性討論，並分析 不同溶菌酶的序列，期能有助於吾人對溶菌酶基因之調控機制更深入的了解。 （關關關：加強子、基因表現、基因調控、溶菌酶、啟動子） 緒言 溶菌酶是一種原核、真核生物均廣泛表現的酶，在禽類、哺乳動物、植物、昆蟲或細菌均可發 現溶菌酶（Newman et al., 1974 ）。它是一種抗菌酶，可將細菌細胞壁的肽聚醣N- 乙醯胞壁酸 （N-acetylmuramic acid ）和N- 乙醯氨基葡萄糖（N-acetyl glucosamine ）之間的β-糖苷關或殼糊精 （chitodextrins ）中N- 乙醯氨基葡萄糖殘基間的關結進行水解（Baird et al., 1990 ），因此，此酶常 被用來打破細菌細胞壁萃取質體DNA （Prather et al., 2003 ）。 溶菌酶基因的表現具組織專一性 （Bonifer et al., 1994 ），主要表現在髓系細胞（包括巨噬細胞、 單核球與其他細胞） 及輸卵管細胞中。在體外，髓系細胞可經由PMA及脂多醣逐步刺激成為單核 球與巨噬細胞 （Lefevre et al., 2005 ），此時巨噬細胞之溶菌酶基因也中大量表現，而製造出溶菌酶。 也就是說，對於髓系細胞而言，雞的溶菌酶基因是一個標中基因。溶菌酶基因在成熟胚源性巨噬細 胞只有微弱表現量，而在成年動物的巨噬細胞中表現量則較高。髓系細胞自然分化過程中，在骨髓 (1) 明道大中生物科技中系，523 彰化縣埤頭鄉文化路 369 號。 (2) 中立中興大中動物科中系，402 台中市中光路 250 號。 (3) 通訊作者，E-mail: mchuang@mail.nchu.edu.tw 2 中中中中中中中中 第四十三卷 第一期 母細胞時期（myeloblast stage ）就檢測到溶菌酶的轉錄情形，隨著轉錄的增加與細胞分化的進行， 在成熟巨噬細胞形成後，溶菌酶的轉錄達到最大表現量（Sippel et al., 1988; Huber et al., 1995 ）。 作者曾利用微陣列基因晶片技術，探討菜鴨輸卵管內組織差異表現的基因，期能尋找分子選種 標記，供標記輔助選拔之用。從微陣列基因晶片雜交試驗的結果發現，ovomucoid 、ovalbumin 及 lysozyme等基因可能與菜鴨繁殖性能有關（Huang