斑节对虾cyclin h 基因的原核表达和蛋白纯化.pdf

东农业科学 2015 年第 3 期 125 斑节对虾cyclin H 基因的原核表达和蛋白纯化 1,2 1,3 1,3 1,3 1,3 郭 松 傅明骏 赵 超 江世贵 杨其彬 1,2 1,2 1,3 彭 超 李伟杰 邱丽华 1.中国水产科学研究院南海水产研究所袁 东 广州 510300 曰2.上海海洋大学水产与生命学院袁 上海 201306 曰3.农业部南海渔业资源开发利用重点实验室袁 东 广州 510300 冤 摘要 cyclin H 是细胞分裂周期调控中的重要因子袁研究斑节对虾 cyclin H 对阐明斑节对虾卵巢发育 制有重要意义遥构建了斑节对虾 cyc lin H 的重组表达质粒 pET 21a/cyc lin H 袁利用原核表达技术进行诱导表达获 得目的蛋白袁并用亲和层析技术进行纯化袁用 SDS尧Western blot 和质谱联用分析诱导和纯化结果遥 结果 表明袁斑节对虾 cyclin H 重组蛋白获得了表达袁纯化的蛋白经鉴定为 cyclin H 重组蛋白曰在 22益和 37益培养条 件下袁 重组蛋白在 LA 和YTGA 两种培养基上均能被诱导表达曰22益条件下袁 部分融合蛋白为可溶 表达曰在 37益培养条件下 LA 培养基获得较好的效果袁且均以包涵体形式存在遥 关键词 斑节对虾曰 细胞周期蛋白 H 曰 原核表达 中图分类号 S917.4 文献标识码 A 文章编号 1004-874X 2015冤03-0125-06 Prokaryotic expression and protein purification of cyclin H in giant tiger shrimp Penaeus monodon GUO Song1, 2, FU Ming-jun1,3, ZHAO Chao1,3, J IANG Shi-gui1,3, YANG Qi-bin1,3, PENG Chao1,2, LI Wei-jie1,2, QIU Li-hua1,3 (1. South China Sea Fishe ries Research Institute, Chinese A cade my of Fishe ry Sc ie nces, Guangzhou 510300, China; 2. College of Fishe ries and Life Science, Shanghai Ocean Unive rs ity, Shanghai 201306, China; 3. Key Laboratory of South China Sea Fishe ry Resources Exploitation Utilization, Ministry of A griculture , Guangzhou 510300, China) A bstract 院T he research on cyclin H (Pmcyclin H) is necessary for understanding the mechanisms involv ing