兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及 - 畜牧兽医学报.pdf

畜牧兽医学报 ， （ ）： １７９５１８０１ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断 方法的建立及初步应用 ， １ ２ １ ３ ２ ４ １ １ 蔡少平 ，王 芳 ，贾华敏 ，张海彬 ，李超美 ，范志宇 ，胡 波 ， 　 　 ２ １ 熊富强 ，魏后军 （ 江苏省农业科学院兽医研究所 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室 国家兽用生物制品工程 １． 技术研究中心，南京 ； 南京农业大学动物医学院，南京 ； 镇江新区兽医卫生监督所， ２１００１４ ２． ２１００９５ ３． 镇江 ； 南京出入境检验检疫局，南京 ） ２１２１３２ ４． ２１０００１ 摘 要：为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒（ ）的检测方法，用胶体金标记纯化的 多克隆抗体， ＲＨＤＶ ＲＨＤＶ 　 以杆状病毒表达系统表达的重组 ＲＨＤＶＶＰ６０蛋白为免疫原制备 ＲＨＤＶ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ，简称单抗）Ａ３Ｃ， 将 ＲＨＤＶＭｃＡｂ和羊抗兔 ＩＧ抗体包被在硝酸纤维素膜上，分别作为检测线和质控线，经条件优化研制成 ＲＨＤＶ ｇ 免疫胶体金试纸条。该试纸条可以检出红细胞凝集试验（ ）效价为 的 悬液，即 检测为阴性的 ＨＡ １∶１０ ＲＨＤＶ ＨＡ 样品，该试纸条检测为阳性，其敏感性高于 ＨＡ；特异性试验结果显示，该试纸条不与家兔其他常见病菌发生交叉 反应。应用该试纸条对 １２７份疑似兔出血症家兔肝脏样品进行初步检测，同时用 ＨＡ做平行试验，阳性符合率为 １００％。因此，该试纸条是一种快速、灵敏、特异的兔出血症病毒检测方法，为兔出血症的现场诊断提供了有效的方 法，显示出很好的临床应用前景。 关键词：兔出血症病毒； 蛋白；单克隆抗体；胶体金免疫层析试验；红细胞凝集试验 ＶＰ６０ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ８５５．３ Ａ ０３６６６９６４２０１２１１１７９５０７ 　　　　 　　　　 犇犲狏犲犾狅犿犲狀狋犪狀犱犘狉犻犿犪狉犃 犾犻犮犪狋犻狅狀狅犳犪狀犐犿犿狌狀狅犮犺狉狅犿犪狋狅狉犪犺犻犮犆狅犾犾狅犻犱犪犾 狆 狔 狆狆 犵 狆 犌狅犾犱犜犲狊狋犛狋狉犻犳狅狉犚犪犫犫犻狋犎犲犿狅狉狉犺犪犻犮犇犻狊犲犪狊犲犞犻狉狌狊 狆 犵 ， １２ １ ３ ２