[试剂盒的储存及有效期] [标本的采集与保存].pdf

SEA663Hu 96T Toll样受体2(TLR2)检测试剂盒 (酶联免疫吸附试验 ) 适用生物：人 使用说明书 仅供体外研究使用，不用于临床诊断! 第11版（2013年07月修订） [预期应用] 本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人组织匀浆、细胞裂解液、唾液、细胞培养上清 或其它相关生物液体 中TLR2含量。 [试剂盒内容] 试剂名称 数量 试剂名称 数量 96孔板(预包被) 1 96孔板覆膜 4 标准品 2 标准品稀释液 1×20mL 检测溶液A 1×120μL 检测稀释液A 1×12mL 检测溶液B 1×120μL 检测稀释液B 1×12mL TMB底物 1×9mL 终止液 1×6mL 浓洗涤液(30×) 1×20mL 使用说明书 1 [需自备的设备及试剂] 1、450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热) 2、单道或多道微量加液器及吸头 3、稀释样品的EP管 4、蒸馏水或去离子水 5、吸水纸 6、盛放洗液的容器 [试剂盒的储存及有效期] 1、 未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶 o 液A、检测溶液B 以及96孔板保存于-20C。 2、 使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于 o -20C，避免潮湿。 注意： 试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后 1个月内使用完毕。 产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。 [标本的采集与保存] 1、 组织匀浆： 1） 取适量组织块，于预冷PBS （0.01mol/L,pH7.0-7.2）中清洗去除血液，称重后备用（组织块较大需先剪碎后 再匀浆）； 2） 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10mL预冷PBS进行充 分研磨，该过程需在冰上进行 （有条件实验室可选用机器匀浆）；得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融 进一步处理（超声破碎过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复2次）。 3） 将制备好的匀浆液于5000×g离心5分钟，留取上清即可检测。 2、细胞裂解液： 1）贴壁细胞需要先用胰酶消化，离心收集细胞（悬浮细胞可直接离心收集）； 2）将收集到的细胞用冷PBS洗3次； 3）物理方法裂解细胞（可先超声破碎细胞，再反复冻融）： i 超声破碎：取适量PBS重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂。 o ii 反复冻融：将待破碎的细胞在-20C 以下冰冻，室温融解，反复3次，使细胞溶胀破碎。 o 4）将标本于2-8C 1500×g离心10分钟，