油松毛虫取食和剪叶刺激胁迫下油松的蛋白质表达差异分析!.pdfVIP

第 52卷 第 8期 林 业 科 学 Vo1．52．No．8 2016年 8月 SCIENTIA SILVAE SINICAE Aug．，20 I6 doi：10．11707／j．1001-7488 油松毛虫取食和剪叶刺激胁迫下油松的 蛋 白质表达差异分析术 王银翠 周 国娜 张 斌 陈明叶 高宝嘉 (1．河北农业大学林学院 保定 071000；2．河北省林木种质资源与森林保护重点实验室 保定 071000) 摘 要： 【目的】研究 自然环境条件下剪叶和油松毛虫不同取食刺激程度双重诱导对油松体 内蛋白质表达的影 响，揭示油松诱导防御反应的蛋白质基础。 【方法】在河北省平泉县的油松一山杏混交林中，选取 15年生左右生长 势一致 的油松 ，进行树上套笼饲养 1O头、3O头油松毛虫和剪叶处理，以未处理油松为对照，采用双 向电泳法测定油 松体内蛋白质表达差异。 【结果】通过蛋白质点表达量的计算，与对照相 比，油松毛虫取食及剪叶刺激后，均有特异 表达蛋 白点、消失蛋 白点、上调蛋 白点及下调蛋 白点，但不同处理间蛋 白点的表达差异不 同。对差异蛋 白点进行质 谱鉴定，数据库检索结果表明，油松毛虫取食后特异表达的蛋 白点是叶绿体 ATP合酶 cv03亚基、抗坏血酸过氧化 物酶、噻唑生物合成酶、Lhcb5蛋 白、ATP合酶 口亚基 以及蛋 白类谷胱甘肽 s一转移酶，下调表达的蛋 白点是蛋 白酶 亚基和假定蛋 白CL304Contigl_01；剪叶刺激后特异表达的蛋 白点是 tau蛋 白类谷胱甘肽 s一转移酶和 Rubisco加 氧酶，下调表达的蛋白点是磷酸甘油酸激酶 I和核酮糖 一1，5一二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基 。进一步分析表明， 取食刺激处理后，胁迫和防御相关蛋 白高度表达，并且 30头松毛虫取食后，与蛋 白合成相关的蛋 白质也特异表达； 剪叶处理后 ，胁迫和防御相关蛋 白也有特异表达 ，而且能量代谢相关蛋 白下调 。说 明取食和创伤刺激可明显诱导 油松防御有关蛋白的表达、光合作用的增强、蛋白质的合成和能量代谢的降低等防御反应。【结论】取食和剪叶刺 激可明显诱导油松防御有关蛋 白的高表达、促进光合作用的增强和蛋 白质的合成 ，降低能量代谢等，这些变化应是 构成油松防御反应 的蛋白质基础。 关键词 ： 油松；油松毛虫；诱导防御反应；取食 ；剪叶；蛋 白质表达差异 中图分类号 ：S718．7 文献标识码 ：A 文章编号 ：1001—7488(2016)08—0068—08 DifferenceinProteinExpressionofPinustabulaeformisInducedby DendrolimustabulaeformisFeedingandLeaf-CuttingStimulation WangYincui ZhouGuona ‘ZhangBin ChenMingye GaoBaojia (1．ForestryCollege，AgriculturalUniversityofHebei Baoding071000； 2．KeyLaboratoryofGermplasmResourcesofForestandForestProtectioninHebeiPrvince Baoding071000) Abstract： 【Objective】Thisstudyaimedatdetectingtheproteinexpressiondifferencesandtheproteinbaseofdefense reactioninChinesepine(Pinustabulaefo )inducedbyleaf—cuttinganddifferentnumberpinecaterpill