金属螯合亲和膜吸附分离与纯化溶菌酶的研究3 ( ).pdf

V o l. 20 高 等 学 校 化 学 学 报 N o. 8　 1 9 9 9 年 8 月 　　　　　　 CH EM ICAL JOU RN AL O F CH IN E SE U N IV ER S IT IE S　　　　　 1322～ 1327　 金属螯合亲和膜吸附分离与纯化溶菌酶的研究 ( ) 不同金属螯合亲和膜对溶菌酶的吸附性能 李　静　陈欢林　柴　红 (浙江大学化工学院, 杭州, 3 10027) 摘要　采用低温氧或氨等离子体法改性聚丙烯微孔膜, 基于等离子体改性膜的活化、偶联及螯合 过程的机理, 制备了F e3+ , N i2+ , Cu2+ 和 Zn2+ 等金属离子螯合亲和膜, 并用于溶菌酶的吸脱附 实验. 实验结果表明, N i2+ 和Cu2+ 离子螯合亲和膜对溶菌酶具有较高的吸附量, 螯合过程中采用 氯化物盐溶液制得的膜对溶菌酶吸附量比采用硫酸盐溶液制得的膜的吸附量高. 两种膜的重复吸 脱附性能相近, 而 F e3+ 螯合亲和膜基本上不能用于重复吸脱附实验. 采用补充金属螯合离子, 能部分恢复亲和膜对溶菌酶的吸附量, 是实现亲和膜重复使用的有效方法. 关键词　等离子体处理, 聚丙烯膜, 金属螯合物, 亲和吸附, 溶菌酶 分类号　 64 1, 028. 8, 55 O TQ Q 亲和膜技术融合了膜分离和亲和色谱两种技术的优点, 使膜的吸附选择性能大大提高, [ 1～ 5 ] 并易于工程放大, 因而成为近几年来较为热门的研究领域 . 根据配基的差异, 可将亲和 膜分为特异性和非特异性两大类, 前者的配基常为抗体或抗原, 其亲和吸附专一, 能获得高 纯度产品, 但具有这种配基的亲和膜制备难度大, 操作费用高; 后者的配基为氨基酸、染料 或过渡金属离子等, 这类亲和膜的吸附分离性能虽不及特异性亲和膜好, 但具有化学稳定性 高、配基价格低廉、制备方便等优点. 因此, 非特异性亲和膜在蛋白质及其它生物物质的分 离与纯化方面有较大的应用前景. 　　 [ 6, 7 ] 早在 1975 年就提出了过渡金属离子如 3+ , 2+ , 2+ 和 2+ 等能与亚胺二 Po rath F e N i Cu Zn 乙酸螯合生成带有多个配位点的亲和配基, 详细论述了这种配基的作用原理及制备方法, 认 为用这种配基制成的亲和色谱能用于蛋白质、多肽、核酸等生物分子的分离与纯化. [ 8 ] 由于亲和色谱技术不易放大, 制约其推广应用, 为此, Iw ata 等 在聚丙烯膜上接枝甲基 丙烯酸缩水甘油酯, 制得铜离子亲和膜用于吸附含有组氨酸亮氨酸的多肽(