ольга в степаненко, олеся в степаненко, а в фонин, д м .pdf

УДК 577.322.72, 577.322.23 Вестник СПбГУ. Сер. 4. 2011. Вып. 4 Ольга В. Степаненко, Олеся В. Степаненко, А. В. Фонин, Д. М. Щербакова, В. В. Верхуша, И. М. Кузнецова, К. К. Туроверов D-ГАЛАКТОЗА/D-ГЛЮКОЗА-СВЯЗЫВАЮЩИЙ БЕЛОК КАК ЧУВСТВИТЕЛЬНЫЙ ЭЛЕМЕНТ СОЦИАЛЬНО ЗНАЧИМОЙ БИОСЕНСОРНОЙ СИСТЕМЫ. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ БЕЛКА С ГЛЮКОЗОЙ∗ Введение. Диабет — широко распространённое в мире заболевание — имеет ряд очен ьтяжёлых последствий [1], таких как развитие слепоты, почечной недостаточно- сти, заболеваний сердечно-сосудистой системы. Очевидно, что непрерывный монито- ринг уровня глюкозы в крови человека имел бы явное преимущество перед периоди- ческим забором крови из пальца пациента, использующимся в мировой практике в на- стоящее время [2]. Поэтому создание биосенсорной системы, позволяющей непрерывно отслеживат ьуровен ьсахара в крови, является чрезвычайно актуальной задачей [3, 4]. Перспективным на рол ьчувствительного элемента такой биосенсорной системы является D-галактоза/D-глюкоза-связывающий белок (GGBP) из Escherichia coli, по- скольку при его взаимодействии с D-глюкозой наблюдаются значительные перестройки третичной структуры белка [5]. Однако константа диссоциации комплекса GGBP с са- харом очен ьнизка (1 мкМ). Это означает, что использование GGBP дикого типа в ка- честве чувствительного элемента биосенсорной системы непрерывного действия для определения концентрации глюкозы в крови человека невозможно. Чтобы биосенсор- ная система работала непрерывно, т. е. чувствовала изменение концентрации сахара, константа диссоциации комплекса белок — глюкоза должна быт ьчисленно близка кон- центрации глюкозы в крови здоровых людей, которая составляет 3–8 мМ [6]. Для этих целей необходимо создават ьмутантные формы GGBP с повышенной константой дис- социации комплекса белок — глюкоза, что может быт