薯片和油条中丙烯酰胺的分析方法af10096 应用及技术 - 博纳艾杰尔.pdf

博纳艾杰尔产品应用案例 薯片和油条中丙烯酰胺的分析方法 AF10096 应用及技术服务部 摘要：本实验重现了《食品中丙烯酰胺的测定》GB 5009.204-20 14 中第一法——稳定性同位素 稀释的液相色谱-质谱/质谱法 （LC-MS/MS ），样品经超纯水提取，先后经 Cleanert® PEP 和 Cleanert® SAS 固相萃取柱净化，Venusil® MP C18 色谱柱（2.1 × 150 mm，5 µm ，100 Å ）分离， 0.1%的甲酸水溶液作为流动相洗脱，三重四级杆质谱检测，内标法进行定量。结果表明：当丙 烯酰胺的加标量为 2 mg/kg 时，回收率在 100% ~ 115%，可以满足检测要求。 关键词：LC-MS/MS ；丙烯酰胺；Cleanert® PEP ；Cleanert® SAS；Venusil® MP C18 前言 丙烯酰胺（acylamide ；CAS 登记号 79-06-1）是一种无色、无臭透明片状晶体； 可溶于水、醇、丙酮、醚和三氯甲烷，微溶于甲苯，不溶于苯和庚烷。相对分子质 量为 71.08，结构式如图 1 所示。丙烯酰胺是一种公认的神经毒素和准致癌物，动物 实验和体外细胞实验都证明丙烯酰胺还可导致遗传物质发生改变，早在 2005 年国际 癌症研究机构就已将其列为 2A 级致癌物质。2002 年 4 月，瑞典国家食品管理局发 现许多含淀粉的食物经过煎、烤、炸等高温烹调后会产生高含量的丙烯酰胺。众多 研究表明薯条、薯片等土豆制品中丙烯酰胺的含量最高，超过饮用水中允许最大限 度的 500 多倍。 NH2 C H C 2 O 图 1. 丙烯酰胺的结构式 因此通过有效的实验技术手段，对食品中的丙烯酰胺进行监控，以确保消费者 对食品消费的安全具有重要意义。 本实验通过优化前处理方法建立了丙烯酰胺在食品中的LC-MS/MS 方法。 实验部分 地址：天津经济开发区西区南大街 179 号 邮编：300462 电话：022传真：022 Email：service@ 网址： 客服：400-606-8099 博纳艾杰尔产品应用案例 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 AB SCIEX API 4000+液相质谱联用仪； 试剂材料 某品牌原味薯片、油条； 甲酸、甲醇、正己烷皆为色谱纯；屈臣氏水； 丙烯酰胺标准品（纯度 99% ），用水溶； D -丙烯酰胺标准溶液（CD =CDCONH ）（浓度500 mg/L，溶剂乙腈）; 3 2 2 80% 甲醇水溶液：取20 mL 水，加甲醇稀释定容至 100 mL； 0.1% 甲酸溶液：移取 100 µL 甲酸并加入 100 mL 水，摇匀； 一次性无菌注射器；尼龙针式过滤器(0.22 µm，直径 13 mm)； Cleanert® PEP 固相萃取柱：200 mg/6 mL ； Cleanert® SAS 固相萃取柱：200 mg/3 mL 。 样品制备 样品提取 准确称取粉碎后的 1 g 样品置于 50 mL 离心管中，加入 200 µL D3 -丙烯酰胺内 标（1 mg/L），再加入 10 mL 水，超声振荡 30 min 后，于 8000 r/min 离心 5 min，将 上清液转移到 15 mL 离心管中，加入 5 mL 正己烷，漩涡萃取 1 min，以 6000 r/min 的速度离心 5 min ，除去上层有机相，