抗体工程制药 - 北大未名bbs.doc

生物技术制药概括和研究进展 简述生物技术、生物药物和生物技术药物的概念 生物技术：利用各种生命系统，如各种生物有机体（包括微生物和动、植物）、其组成部分（包括器官、组织、细胞和细胞器）以及细胞内含物（包括核酸、蛋白质、多糖以及各种次生代谢物）来生产特定的生物产品。（The use of living systems, such as organisms, tissue cultures, live cells, or cell enzymes, to make a defined biological product） 生物药物：利用生物体内的初级或次级代谢产物、生物组织或整个生物体生产的用于预防、诊断或治疗疾病的医用品（来源于细菌、酵母、昆虫、植物和哺乳动物的活性物质） 生物技术药物：利用DNA重组技术、单克隆抗体技术以及其他生物技术研制开发的蛋白质、抗体或核酸类药物 生物技术药物的种类及常见的生物技术药物是什么? 生物技术药物可分为：重组蛋白药物、治疗性抗体、核酸药物和其他生物技术药物 重组蛋白药物－细胞因子类：干扰素类，白细胞介素类，集落刺激因子类，肿瘤坏死因子类，红细胞生成素，生长因子类 －激素类：胰岛素，生长激素，降钙素，心钠素和利钠多肽家族 －溶血栓类：链激酶，尿激酶，葡激酶，组织型纤溶酶原激活剂 －可溶性受体（指细胞膜受体胞外与配体结合的膜外区，由于多种原因自胞膜脱落但仍保留和配基结合能力的受体）：肿瘤坏死因子可溶性受体，白细胞介素－1可溶 性受体，白细胞介素－4可溶性受体 －血液代用品：人血清白蛋白，血红蛋白 －导向毒素类：细胞因子导向毒素，单克隆抗体导向毒素 生物技术药物与传统药物相比有哪些重要特点? 特点：分子量大，分子结构复杂；存在种属特异性；用量小，活性强，相对其他药物副作用小、毒性低、安全性较高；不稳定，易变性，易失活，也易被微生物污染和酶解破坏；生产过程中，基因、生产菌株或细胞系以及生产条件的稳定性要求高，如发生变化将造成生物活性的变化；免疫原性：来源于动物的药物可在人中产生免疫和过敏反应；在人体内半衰期短，降解快，降解部位广泛；生物技术药物的批次间一致性和安全性的变化大于化学药品 生物技术制药与传统制药相比的优点：可使活性蛋白或多肽在各种生物反应器中高效表达，可获得天然来源难以得到的生理活性物质，使之成为新药，如人生长激素，胰岛素等；可获得足够数量的生物活性物质以对其结构、功能和性质进行深入研究，从而改造天然生理活性物质，提高生理活性，开发更多的新型生理活性物质；如对白介素2和tPA的改造；通过对微生物的改造，可获得新型化合物，扩大药物来源，如红霉素衍生物的研究。 简述生物技术药物研发的热点? 热点： 应用基因工程抗体抑制肿瘤， 应用导向IL-2受体的融合毒素治疗肿瘤， 应用基因治疗法治疗肿瘤，如应用γ-干扰素基因治疗骨髓瘤。 自身免疫性疾病 冠心病 抗体工程制药 简述抗体药物的概念和特点。 概念：通过细胞工程和（或）基因工程方法制备的用于治疗的单克隆抗体、抗体片段、基因工程改造的抗体以及抗体免疫偶联物或抗体融合蛋白称为抗体工程药物，又称抗体药物（抗体的概念：由抗原诱导的淋巴细胞合成和分泌的具有特殊氨基酸序列和结构的免疫球蛋白分子） 特点： 特异性 与相关抗原的特异性结合 对肿瘤等靶细胞的选择性杀伤作用 多样性 抗原的多样性 抗体结构的多样性 抗体活性的多样性 免疫偶联物的多样性 制备时的定向性 针对特定的靶分子定向制备抗体药物 根据需要选择抗体药物的“效应分子” 什么是单克隆抗体？简述制备针对特异性抗原的单克隆抗体的基本过程。 单克隆抗体：具有分泌抗体能力的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞经无性繁殖形成的细胞系分泌产生的活性、亲和力均相同的抗体（特点：抗体分子在Aa序列和空间构型上均相同，单抗具有高度的特异性，产生单抗的细胞系可长期传代并保存，可持续生产同一性质的抗体） 制备针对特异抗原的单克隆抗体：一般选40-50%的PEG 进行诱导（细胞融合后培养液中有脾-脾、脾-瘤、瘤-瘤、脾、瘤等细胞）；常用的选择性培养基为HAT培养基（瘤细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺乏株）将经融合的混合细胞用HAT培养液悬浮稀释；一般在含有饲养细胞的96孔板中进行；在融合后7d用HAT选择培养基培养，7-14d用HT培养基培养，14d后用完全培养基培养；选择培养后，只有杂交瘤细胞才能生存（但不是所有的杂交瘤细胞均能产生所需的抗体）；产生特定抗原的抗体的B细胞只占所有脾细胞的5％左右；用抗原对所有小孔的培养上清进行抗体检测，筛出能产生目的抗体的杂交瘤细胞；将能产生目的抗体的培养小孔中的杂交瘤细胞进行稀释；可用有限稀释法和软琼脂法（有效稀释时，将细胞稀释液分加到96孔板中