deangelis pl heparosan polysaccharide for drug - 济宁医学院学报.docVIP

肝素原应用研究进展 陈祥娥 （，山东 276826） 摘 要：是某些菌荚膜中多糖骨架的二糖重复单位，同时也肝素和硫酸乙酰肝素的生物合成前体。 关键词：；； 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： CHEN Xiang-e (School of Biological Sciences, Jining Medical University, Rizhao 276826, China) Abstract: Heparosan is the polysaccharide found in the capsule of certain bacteria, as well as the biosynthesis precursor of heparin or heparan sulfate in animals. Now, research mainly focused on the chemical or biological modifications of heparosan that obtained by fermentation as a kind of non-animal origin production of heparin. It has been recently found that heparosan can serve as good drug carrier, regulate the intestinal flora and so on. This article reviews the latest progress of its application. Keywords: Heparosan; Heparin; Drug carrier; Intestinal flora 肝素原（heparosan，又称N-acetylheparosan），β-D-GlcA-1,4-α-D- GlcNAc-1）n （其中GlcA代表葡糖醛酸；GlcNAc代表乙酰氨基葡糖]，是某些菌荚膜中多糖骨架的二糖重复单位，同时也肝素和硫酸乙酰肝素的生物合成前体细菌荚膜的发现，引起了广泛关注。因为它使通过细菌合成，化学或生物修饰生产肝素HS成为可能。二糖骨架结构与脊椎动物中的肝素类似，但未硫酸化，也没有将GlcA异构化为IdoA）[2]。大肠杆菌K5 (Escherichia coli K5)，多杀性巴氏杆菌D型 (Pasteurella multocida type D)以及副鸡禽杆菌基因型IIAvibacterium paragallinarum genetype II）3种[3-5]。肝素原可以通过微生物发酵提取或重组酶体外合成。目前，文献报道的发酵生产多采用E. coli K5。Wang等[]采用优化培养基，富氧给予并指数补加葡萄糖，在7 L发酵罐中培养E. coli K5菌株制备，产量可达15 g/L，分子质量为5.8×104，重均分子质量为8.4×104。肝素被发现年，作为抗凝血和抗血栓药物广为应用2008年严重过敏反应甚至死亡成为广泛关注的焦点，引发了对非动物来源生产的需求脊椎动物合成肝素或HS的过程是先催化合成作为前体聚合物，然后在一系列酶的作用下进行硫酸化及异构化修饰，生成的高度N-, O-硫酸化，IdoA含量较高的多糖链为肝素，而部分修饰后生成的O-硫酸化程度较低，GlcNAc、GlcA含量较高的多糖链为HS。以为前体，是一种较有希望的替代方法。N-去乙酰化酶/ N-转移酶N-deacetylase/N-sulfatransferase, NDST）的作用下获得N-去乙酰化/ N-硫酸C5-异构化酶C-5 epimerase, C5-epi）作用下将大部分GlcA异构化为IdoA后，经2-O-磺基转移酶2-O-sulfotransferase, 2-OST）、-OST和-OST的依次作用，在IdoA的C2位，GlcA的C3和C6位进行硫酸化修饰，即可获得具有抗凝血活性的肝素或HS[16-20]。部分修饰可生成N-硫酸化NSH）、O-硫酸化OSH）、N,O-硫酸化NOSH）、差向异构化N,O-硫酸化Epi-NOSH）等一系列衍生物。采用肝素原作为前体还可修饰获得低分子肝素类产品，如Arixtra[21]。 Bhaskar等[22]研究开发了一锅烩化学酶法合成肝素的制备工艺。构建可表达C5-epi、2-OST、6-OST-1、6-OST-3、3-OST-1和芳基磺基转移酶IV（AST IV）融合蛋白的E. coli，发酵培养获得重组酶。具体制备工艺是先化学修饰肝素原获得NSH作为底物。在缓冲体系中加入3′-磷酸腺苷5′-磷酰硫酸以为起始物，修饰生成的多种衍生物主要有抗凝血、抗炎、抗癌抗病毒