L-半胱氨酸脱巯基酶拆分DL-半胱氨酸生产D-胱氨酸的分析.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 D．半胱氨酸是一种重要的医药中间体，在医药、食品等领域有着广泛的用 途。由于D．半胱氨酸在医药领域具有不可替代的作用，使其价格远高于。半胱 氨酸和DL．半胱氨酸。探索一种能够有效拆分DL-半胱氨酸来获得D．半胱氨酸 的方法，具有广阔的应用前景和工业价值。 本实验室从天然环境中筛选出一株恶臭假单胞菌TSll38，该菌能够利用工 业废料DL．ATC生产L．半胱氨酸，但是由于其含有的L．半胱氨酸脱巯基酶能够 分解L-半胱氨酸，使得L半胱氨酸的积累受到了影响。 本研究以L．半胱氨酸脱巯基酶为研究对象，从拆分DL．半胱氨酸的角度出 coliBL21 发，首先，对构建的具备表达L半胱氨酸脱巯基酶的基因工程菌株E 密度为A600=o．5、IPTG诱导浓度为20 h，在最佳条件下， mg／L、诱导时间为2 酶活力为126．5 U／g；随后，对该酶拆分DL-半胱氨酸的条件进行了优化，确立 了最佳条件，分别为：反应pH值为8．8、反应温度为45℃、底物浓度为6扎、 h。在最适条件下进行了DL-半胱氨酸的 酶源细胞浓度为13班、反应时间为l 拆分反应，将得到的D．半胱氨酸氧化为D．胱氨酸后进行分离纯化；最后对得到 的产品进行了鉴定，各项检测指标均合格，纯度为95．1％。 本研究为D．半胱氨酸和D．胱氨酸的生产提供了一条新的绿色生产途径，并 具备一定的产业化前景。 关键词：L．半胱氨酸脱巯基酶，DL．半胱氨酸，拆分 abstract Abstract are crud forcefininoxsodium．There isakindof drug many D-cysteine not in foodfield．Theroleof cail of medicineand D·cysteine D—cysteine applications a of ismuch thanthatof be result,the higher L-cyst：eine replaced．As priceD·cysteine theresolutionof is and fora torealize DL·cysteine way DL．cysteine．Searching valuableand promising． a of TS1138 innatural Wehavescreenedout strainPseudononas putida straincanconvertDL-ATCinto env