实验背景：乳酸是整个心肌缺血代谢反应的终产物，之前已有研究显示.PDF

材料和方法 一. 實驗動物：分為倉鼠、狗和人三種模式 （一）倉鼠為購自美國 Biobreeders 公司的敘利亞雄性倉鼠和國科會兩種進 行實驗。實驗時，由頸部皮下注射 heparin （5000 iu/kg ），30 分鐘後 ， 再以 sodium pentobarbital （50 mg/kg ）進行腹腔注射麻醉，待動物完 全麻醉，剪開胸骨迅速取出心臟置於 HEPES-Tyrode 溶液中。 （二）取雜種狗 （15-20 kg），實驗時先以 ketamine （10mg/kg ）靜脈注射再 隨之以sodium pentobarbital （30 mg/kg ）和肝素 （5000 iu/kg ）靜脈注 射，待完全麻醉後從第五肋間將胸骨打開，取出心臟和肺臟置於正常 Tyrode 溶液中，分離心房連同肺臟和心室。 （三）人的心室組織來源是來自振興醫院的換心手術，取換心手術中病人的 心室置於Cardioplegia 溶液中，攜回研究室實驗。 二. 離體組織實驗(7) ： （一）狗肺靜脈組織實驗 將上述所分離的心房和肺臟取左心房約 5 mm （除去內皮），取左上及左 下肺靜脈組織長度分別約 8 和 5 mm ，從 sleeve 末端到靜脈約取 15 mm ， 寬度 4 mm 的標本置於組織槽中，以正常 Tyrode solution 灌流，使用氣體為 15 97 % O2 和 3 % CO2 ，37 ℃飽和時的pH 值為 7.35 ± 0.01 （Microcomputer pH-vision 6071, Jenco Electronics Ltd, England ）。心房端固定在組織槽中，靜 脈端以絲線綁於不鏽鋼棒，連接於張力轉換器（Grass FT03C force transducer ），以多頻道記錄器（TA 6000 及ES 2000, USA ）記錄等長收縮張 力（isometric force ），溫度維持37 ℃。心房肌以電刺激產生器（Grass S88 stimulator, USA ）給予每秒 1 次（1 Hz）的電刺激頻率，以刺激其反應 ，並以 傳統玻璃微電極記錄動作電位。玻璃微電極以外徑 1.5 mm 內徑0.86 mm 之 硼矽玻璃（borosilicate glass, Sutter Instrument, Novato, CA, USA ）管為材料， 由微電極製作器（David Kopf Instrument, Model 700C, USA ）拉製，充滿3M 的 KCl ，連接於動作電位放大器（Duo 773, World Precision Instrument, USA ） 由示波器（Gould Oscilloscope DSO 4072, USA ）顯示動作電位之變化，並由 多頻道記錄器（TA 6000 及 ES 2000, USA ）和電腦（Axoscope 8.0, Axon Instruments ）記錄之。 實驗中給予標本至少一小時的穩定時間再開始測量心房肌的動作電位， 確定之後將記錄器移至離 myocardial sleeve 末端約 2 mm 處記錄是否有自 發性動作電位產生，所記錄點為 adventitia 的位置，或以藥物 acetylcholine (7) 或 isoproterenol 誘發之。 。當發現動作電位後，給予藥物乳酸鹽（10 mM ， pH 7.33 ± 0.03 ）或乳酸（10 mM ，pH 7.03 ± 0.05 ）記錄動作電位改變和收 縮力變化。 16 （二）倉鼠的心室乳突肌和人的心室小樑肌組織實驗 取倉鼠心室乳突肌和從振興醫院取回的人心室小樑肌置於組織槽中實 驗，灌流溶