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海南大学 《海洋生物学》课程论文 题目名称： 海兔毒素研究进展 姓 名： 学 号： 20110412310022 学 院： 材料与化工学院 专业班级： 生物工程（1）班 指导教师： 柴柯 　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 2014年 12 月 21 日 海兔毒素研究进展 文传协 材料与化工学院 生物工程专业 摘要：海兔毒素是海洋生物毒素之一，发现自食藻软体动物长尾背肛海兔的消化腺，因此命名为海兔毒素。该毒素为线性缩肽类天然细胞毒性蛋白，在生物体中含量极少。具有高抗癌作用。 海兔毒素10 (dolastatin 10, D10)是从海洋无壳软体动物截尾海兔中分离提取的由4个氨基酸组成的线性缩肽类天然毒性蛋白。dolastatin 10及其衍生物可以抑制细胞有丝分裂，具有很强的抗肿瘤活性，已进入临床研究阶段。文中综述对海兔毒素的介绍、抗肿瘤作用、dolastatin 10的合成、dolastatin 10及其衍生物及衍生物与相应单克隆抗体偶联物的临床疗效。 关键词：海兔毒素；抗肿瘤；dolastatin 10；dolastatin 10衍生物；单克隆抗体偶联物 一、海兔毒素介绍 海兔毒素最旱发现自食藻软体动物长尾背肛海兔的消化腺，因此命名为海兔毒素。该毒素为线性缩肽类天然细胞毒性蛋白，在生物体中含量极少，食用海兔毒素后半小时发病，主要表现为全身刺痛、发热、呕吐、腹泻，继而面部、肢体和手足的肌群出现自发性收缩、震颤、共济失调等神经紊乱症状，最严重时出现呼吸困难，极度烦燥及视物扭曲。 海兔毒素10 (dolastatin 10, D10)是从海洋无壳软体动物截尾海兔中分离提取的由4个氨基酸组成的线性缩肽类天然毒性蛋白。它是一种九肽，在生物体中含量极少。Pettit的研究组至今已鉴定出18个含有特殊氨基酸的较短链状肽类化合物，命名为dolastatin1～18。其中Dolastatin3，Dolastatin10（D10），Dolastatin15的结构被确定。而D10是抗肿瘤活性最强的，一般都以D10作为海兔毒素的代表。 二、海兔毒素的抗肿瘤作用 海兔毒素是高活性的抗癌活性肽，主要用于小细胞肺癌、卵巢癌、黑素瘤和前列腺等实体瘤的治疗，尤其是D10已进入Ⅱ期临床。由于具有确切的作用机制及温和的毒性反应，D10很有可能成为联合用药的首选药物之一。 D10是一种有效的抗有丝分裂药，其抗肿瘤机制主要是通过与β微管蛋白的氨基酸残基结合，影响新的异二聚体的加入，导致二聚体间的界面产生弯曲，累积后导致原来直纤丝弯曲，抑制微管的形成和聚合，并促使其解聚，同时阻碍微管蛋白依赖的GTP 水解，阻碍细胞的有丝分裂，使细胞停滞在细胞间期，且对多种癌细胞有诱导凋亡作用，是一类来源于海洋生物的新型细胞生长抑制剂。进一步研究表明，D10可结合到微管蛋白上的根霉素/美登素交换GTP 的结合位点，导致细胞阻滞在M期。在与其他抗有丝分裂药物的比较发现，D10对细胞活性的抑制效果IC50= 0．5nMol / L，约为长春碱（vinblastine）的40倍，根霉素（rhizoxin）的2倍，拟茎点霉毒素A（phomopsin A）的10000 余倍，与美坦辛（maytansine，IC50= 0.5 nMol/L效果相当。研究还发现D10在细胞内的滞留时间比长春碱长很多。D10通过巯基与微管蛋白结合与拟茎点霉毒素A相似，但与长春碱和美坦辛不同。实验研究表明D10是长春碱类药物的非竞争性抑制剂，当将其与作用于微管的药物长春碱合用时显示协同作用。 D10可以抑制弥漫性大细胞淋巴瘤细胞中凋亡信号通路关键蛋白bcl-2和p53蛋白的表达，诱导细胞凋亡。通过研究D10 对黑色素瘤细胞染色体形态学、端粒联合、诱导多倍性的影响，发现D10 可能通过介导末端着丝粒的丢失，诱导染色体畸变从而抑制恶性黑色素瘤细胞生长。 三、Dolastatin10的合成 D10是由4个氨基酸组成的线性缩肽类天然细胞毒性蛋白，含有9个不对称碳原子，从氨基端开始依次是dolavaline（Dov）、valine、dolaisoleuine（Dil）、dolaproine（Dap）4种氨基酸及特异的可能从苯丙氨酸分离出来的伯胺dolaphenie（Doe）作为羧基端缩合而成，故有研究者称其为5肽产物，相对分子质量为784。D10有一系列同分异构体，其中一些具有生物效应。 天然的D-10产量极