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第十课基因信息传递
四、DNA损伤(突变)与修复 DNA Damage (Mutation) and Repair 复制差错和化学和物理因素造成体内DNA损伤或突变或致死 突变(mutation):指一种遗传状态,可以通过复制而遗传的DNA结构的任何永久性改变。携带突变基因的生物称为突变体,未突变的称为野生型。 损伤原因也可以说是遗传信息突变的来源 DNA复制产生误差; 物理(紫外、高能射线、电离辐射)或化学(烷基化试剂、亚硝酸盐、碱基类似物)损伤; 生物因素(碱基对置换、碱基的插入/ 缺失造成移码)。 DNA分子的自发性损伤 物理因素引起的DNA损伤 嘧啶二聚体的形成与解聚 化学因素引起的DNA损伤 (二) DNA损伤的修复(DNA repairing) 修复是指细胞对DNA受损伤后的一种反应,这种反应可能使DNA结构恢复原样,重新执行它原来的功能。也可以说,针对已发生了的缺陷而施行的补救机制。 修复的主要类型: ①光修复(light repairing) ②切除修复(excision repairing) ③重组修复(recombination repairing) ④SOS修复 光修复 紫外光照射可使相邻的两个T 形成二聚体 光修复酶可使二聚体解聚为单体状态,DNA完全恢复正常。光修复酶的激活需300-600μm波长的光。 切除修复(excision repair) 参与的酶有 核酸内切酶,polⅠ ,DNA连接酶 E.Coli 的切除修复方式 重组修复(recombination repair) 又称复制后修复(postreplication repair) 受损伤的DNA在进行复制时,跳过损伤部位,在子代DNA链与损伤相对应部位出现缺口。通过分子间重组,从完整的母链上将相应的碱基顺序片段移至子链的缺口处,然后再用合成的多核苷酸来补上母链的空缺,此过程即重复修复。并非完全校正。 SOS修复 指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式,修复结果只是能维持基因组的完整性,提高细胞的生成率,但留下的错误较多,又称倾错性修复(Error-Prone Repair )。 1)逆转录 在逆转录酶的作用下以RNA为模板合成DNA的过程。此过程中,核酸合成与转录(DNA→RNA)过程遗传信息的流动方向相反(RNA→DNA),故称为逆转录(reverse transcription) 。 2)逆转录酶 能催化以单链RNA为模板合成双链DNA的反应的酶称为逆转录酶(reverse transcriptase)。 它兼有三种酶的活性:RNA指导的DNA聚合酶,DNA指导的DNA聚合酶和RNase H活性。 所谓RNase H活性是指除去杂合分子中的RNA。它可以从5′→3′和3′→5′两个方向水解DNA-RNA。 逆转录酶和其他DNA聚合酶一样,合成DNA的方向为5′→3',并且不能从头合成DNA,也需要引物,是病毒本身的一种tRNA。 (二)逆转录过程 1.以单链RNA的基因组为模板,在逆转录酶(RNA指导的DNA聚合酶)的催化下,合成一条单链DNA; 2.产物与模板生成RNA∶DNA杂化双链,杂化双链中的RNA被逆转录酶(RNase H)水解; 3.以新合成的单链DNA为模板,逆转录酶(DNA指导的DNA聚合酶)催化合成第二链的DNA。 (三)逆转录酶和逆转录现象的生物学意义 1)逆转录酶和逆转录现象是分子生物学研究中的重大发现 ; RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能。 2)对逆转录病毒的研究,拓宽了病毒致癌理论; 3)分子生物学研究应用逆转录酶(cDNA法),作为获取基因工程目的基因的重要方法之一。 (二) RNA聚合酶 定义:以DNA为模板,催化三磷酸核苷(NTP) 聚合形成RNA的酶。 作用特点: DNA为模板 不需引物,游离NTP能与RNA链或另一NTP聚合. 3-OH与5-P聚合形成磷酸二酯键。 方向:5→3。 转录终止信号有两种情况 弱终止子:依赖ρ因子(终止因子,terminators)的终止 NusA蛋白识别DNA链上的终止信号,在ρ因子帮助终止。 强终止子(1)在终止点之前具有一段富含G-C的回文区域。(2)富含G-C的区域之后是一连串的dA碱基序列,它们转录的RNA链的末端为一连串U(连续6个)。 1. 转录因子:参与RNA聚合酶进行转录活动的辅助因子,为 蛋白质。 2.启动子:指RNA聚合酶?的识别、结合和开始转录的一段DNA。 在RNA转录起点的上游,约40 bp。——TATA box 3.终止子:提供转录停止信号的DNA序列(片段)。 一般含有回文顺序,转录到此会形成发夹结
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