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TIMP-1抑制高糖引起的大鼠肾小球系膜细胞凋亡
TIMP.1抑制高糖引起的大鼠肾小球系膜细胞凋亡
硕士研究生: 代文迪
指导教师: 林洪丽 教授
专业名称: 内科学
摘 要
目的:探讨TIMP一1是否影响高糖诱导的肾小球系膜纽胞凋亡及其
作用机制。
方法:
mmol/L、20mmol/L、
1)大鼠肾小球系膜细胞分别经含5mmol/L、10
30mmol/L、40
养24h、48h、72h后用流式AnnexinV/PI双染法检测凋亡率。
2)用脂质体将正、反义人TIMP一1及空载体转染到肾小球系膜细
性鼠TIMP一1表达的影响。
3)描绘各组细胞的生长曲线。
4)高糖刺激24小时后丫啶橙染色,荧光显微镜下观察。
Assay
检测bax和bcl-2的表达:CaspACETM
盒检测Caspse-3的蛋白活性。
结果:
1)高糖以剂量一时间依赖的方式诱导大鼠肾小球系膜细胞凋亡,
肾小球系膜细胞凋亡,PO.05.
基因。反义TIMP一1组大鼠内源性鼠TIMP—l表达减少,而其他组则无
明显变化。
3)生长曲线结果:转染正义TI押一1组生长最快,而转染反义
TIMP一1组贝II生长最慢,空载体组和未转染组居中。
4)丫啶橙染色结果显示:转染正义TIldP—l系膜细胞组几乎无凋
亡细胞;转染反义TIMP一1系膜细胞组凋亡细胞最多;空载体组及未转
染组居中。
达下降,而转染反义TIMP一1组bax表达增高,空载体组及未转染组无
空载体组和未转染组则无明显变化PO.01。
结论:
1)高糖能够以剂量一时间依赖的方式诱导大鼠系膜细胞凋亡。高
渗无诱导凋亡的作用。
2)TIMP-1能够促进肾小球系膜细胞的生长,并通过抑制Bax、
Caspase一3经典的细胞凋亡途径来抑制凋亡。
关键词:凋亡 金属蛋白酶组织抑制剂一1 高糖 转染
·2‘
Tissueinhibitorof 1 rat
metalloproteinase
protects
cells
mesangialagainsthighglucose
induced
apoptosis
WenDi
Postgraduate:Dai
Adfisor:ProfessorLin Li
Hong
Medicine
Speciality:Internal
Abs仃act
Tissueinhibitorof
whether
obieetive:Discuss
rat cells induced
effectmesangial glucose
I(TIMP.1)call againsthigh
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