蛇足石杉侧芽的发生与培养研究.PDF

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 17 期 2016 年 9 月 • 3103 • 蛇足石杉侧芽的发生与培养研究 * 刘江海，马英姿 ，张家玲，许 欢 中南林业科技大学生命科学与技术学院，湖南 长沙 410004 摘 要：目的 蛇足石杉 Huperzia serrata 自然繁殖能力低，资源极其匮乏，对蛇足石杉的快速繁殖技术进行探讨。方法 取 活体茎尖，依次用多种消毒剂进行表面消毒，再用孔雀石绿及原子吸收光谱（AAS ）联合杀灭内生真菌，得到无菌苗接种到 1/2 MS ＋25 g/L 蔗糖的培养基中，无菌苗在二叉分枝后的新枝长到 4～5 cm 时剪下进行继代培养。结果 无菌苗分别在 4 次二 叉分枝生长继代培养后，得到了数量不等的侧芽，侧芽的发生位置位于茎段中部或上部近茎尖处，侧芽的结构与芽孢的结构 明显不同；不同植株培养获得的侧芽数不同，最多的植株可产生 14 个侧芽，一个侧芽发生点可产生一个或多个侧芽；去除 茎尖顶端优势后，茎段中部的侧芽生长速度加快；不同高度的侧芽拨离母株后，成活率差别大，5 mm 以上的侧芽接种到 1/2 MS＋30 g/L 蔗糖的培养基上，存活率可达 90%，120 d 后生长为 2～3 cm 的幼苗，低于 5 mm 的侧芽，拨离接种后死亡 率较高。结论 蛇足石杉在离体培养中，可打破自然生长状态下叶腋内只产生孢子囊而不产生侧芽的生长方式，可形成多个 增殖侧芽，侧芽剥离后极易产生不定根，为蛇足石杉的试管苗增殖方式提供重要参考。 关键词：蛇足石杉；离体培养；侧芽发生；侧芽增殖；孢子囊；存活率 中图分类号：R282.12 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)17 - 3103 - 06 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.17.024 Study on lateral buds induction and culture of Huperzia serrata LIU Jiang-hai, MA Ying-zi, ZHANG Jia-ling, XU Huan College of Life Science and Technology, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, China Abstract: Objective Due to the low reproductive capacity and scarce resources of Huperzia serrata, and in vitro culture of H . serrata has not been really successful, we wish to make a good progress in rapid propagation in this study. Methods Living shoot tips were used as the materials, after a variety of surface sterilization, malachite green and AAS were used to eliminate the endophytic fungi of the seedling. Then, the aseptic seedlings were transplanted to the medium with 1/2 MS + 25 g/L sucrose to be cultured. After the new dichotomous branching occurred, and the branches grew to 4—5 cm high, we cut it and subcultured for the new dichotomous branching. Results After four times of subculture of dichotomous branching, the aseptic seedlings got the d