Wolbachia感染对雄果蝇繁殖力影响机理的研究.pdf

摘要 Wolbachia是普遍存在于节肢动物和丝状线虫体内的胞内共生菌，它通过雌性 卵的细胞质传递给子代。目前已有研究表明，在全球范围内约有70％的昆虫种类受 殖方式发生多种改变，比如精卵细胞质不亲和(CI)、雌性化、孤雌生殖和杀雄等， 感染或感染不同品系Wolbachia的雌性宿主交配后，胚胎孵化率很低甚至全部死亡。 细胞学研究发现，在CI胚胎中，雄性原核发育滞后，与雌性原核发育不同步，最 终导致胚胎死亡。由于Wolbachia分布广泛，且对宿主的生殖方式产生多种影响， 因此它己成为最有潜力的媒介昆虫和农业害虫生物防治的工具。Wolbachia的研究， 尤其是CI机制的研究以及Wolbachia对媒介昆虫宿主影响的研究已经成为国内外学 者研究的热点之一。关于CI的分子机制，虽然已经有了部分的研究报道，但其确 切的机制还未知。我们研究组从Wolbachia感染对果蝇精子育性的角度来研究CI 的分子机制。 本研究组前期以Wolbachia感染和未感染的果蝇三龄幼虫精巢为研究对象，采用 的基因296个。本研究首先从这些差异表达的基因中挑选了7个差异倍数较大、且可 CGJ7934一RA、CGJ 7934．RA和CGJ 水平具极显著差异(P0．01)：而CG908，．RA、CGJ7268-RA的表达 感染的精巢中都显示上调表达，且上调的倍数很高。该基因编码的保幼激素诱导蛋 生殖系中特异表达，且与精子的移动有关，因此，本研究对这两个基因进一步做了 感染的要弱。这正表明这两个基因确实是在果蝇幼虫精巢中表达，且Wolbachia感染 导致．聊二26在果蝇早期精巢中表达上调，却使得Mst84Db在果蝇早期精巢中表达下 调。前人的研究发现，幼虫发育期快的Wolbachia感染的雄果蝇，其引起的CI强度越 育，幼虫期发育最快的雄性果蝇产生了未完全成熟的精子，使得受精后雄性原核发 育滞后，导致雌雄原核发育不同步，最终导致胚胎死亡。 滋养细胞凋亡、脑的形态建成、性腺的发育等有关。已有研究表明，在肠肠突变果 蝇中，滋养细胞凋亡过程受阻，在，o肠突变果蝇卵巢程序性细胞死亡过程中，染色 因的表达是显著下调的，因此lola．rp可能在精子发生过程中起重要作用。为了进一 分析。组织特异性分析结果显示，lola—rp在果蝇的脑和卵巢中高表达，在成体精巢 中也有一定量的表达，而在幼虫阶段表达量较低，表明其可能在脑的发育以及生殖 细胞的发生过程中起作用。此外，在胚胎发育过程中，从3h胚胎开始就检测到lola．rp 的表达，且在整个胚胎期都维持在较高水平，说明黑腹果蝇如肠．馏可能是母源性基 因，且在早期胚胎发育过程中发挥重要作用。 达水平发生下调，在注射dsRNA24h后就起到了干扰的效果，注射后72小时，基 因敲降幅度最大。与对照组相比，基因敲降后的雄蝇繁殖能力显著下降，与未感染 Wolbachia的雌性果蝇交配后胚胎孵化率显著低于对照组，这与CI现象类似。另外， 对未孵化胚胎的表皮进行研究发现，表皮上没有体节的出现，说明未孵化胚胎停滞 因的转录，从而使精子正常结构和功能发生异常，最终导致与雌性果蝇交配后，胚 CI的分子机制之一。 n 动物生殖细胞发生调控机制及共生菌与其宿主间的相互作用的研究奠定基础，在性 别控制、农业害虫和媒介昆虫的生物防治等方面的应用基础研究领域，也具有潜在 应用价值。 Mst84Db Abstract that WolbachiaiStheintracellularbacterialinfectsawide of symbiotic range and istransmittedto the of nematodes，it arthropods offspringthroughcytoplasmeggs． haveshownthatthereis to70％insecttha