宿主细胞对LPS刺激的应答机制中金属蛋白酶结构域和解整合素结构域的表达及其分子生物学意义.pdfVIP

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2017-07-25 发布于上海
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宿主细胞对LPS刺激的应答机制中金属蛋白酶结构域和解整合素结构域的表达及其分子生物学意义.pdf

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宿主细胞对LPS刺激的应答机制中金属蛋白酶结构域和解整合素结构域的表达及其分子生物学意义

兰生墅垫查兰缝釜篓兰堕————j墼兰謦望童i圣第一部分宿主细胞对LPS露||激的癍答褫蠲审金属蛋翻酶缝掏城和解整食素结构域的表达及其分子生物学意义摘要鑫豹：研究炎症诱警荆和籀镧裁对宿主细魏反应往瀚影响，深入探讨炎症机理，为开发控制炎症的天然抑制物提供科学依据。方法：(1)乖j用PcR技术壳隆出肿瘤坏死因予一n转换酶(TACE)金属灏白酶区cDNA，构建于辑型原核表达载体pET—DsbA”遴幸亍诱导表达。(2)采用鼹位杂交分别检测体外培养的入急性早幼粒自觚痫细胞系(HL一60)在大肠杆菌内毒素(LPS)期中药：i尘射滚“热毒瀵”(RDQ)分露提撵弱下，金羼蛋爨薅区翻辩整合豢区基因转录水平。获得高表达，表达爨约40．8％。(2)原位杂交分析显示HL一60细胞在LPS刺激0—10小时内金耩蛋自酶区转最活性增加16．1％，解整合素区转添活性增加 76．8％。(3)RDO能最著降低LPS诱导的TACE mRNA的增加(PO．01)。y 结论：(1)获褥高表达人TACE金属蛋囱酶区融合蛋白，而TACE又是TNF— a出膜型良分泌型转换过程中起主要馋恩鲍酶，它瓣克隆秽褒这对葵竞争瞧默类抑制剂的筛选有鬣要作用。(2)此外，通过原位杂交对2种探针的特异性研究{囊明炎痉豹诱导藏攘割避程中涉及较多懿靶基嚣表达，蕊解整合素嚣对于 TACE酶的活性更为煎要；并且解楚含素区的探针对反映TACE活性熙具特异性纛代表性。3)缝中药注射液燕毒溥(RDQ)对TACE转录活性的稀翻作用，剐有望成为抑制TACE的纯天然药物。关键词：瓣瘤坏死因子一a转换酶；大肠杆菌豫毒氯原位杂交：热毒清 { 2 兰生型垫盔兰旦堕堕兰堕一———————兰坠兰鲨!!!兰 MPand andits Significance The of Biological Fragment Expression Disintegrin to ofLPS stimulation in ofHostCells Response Abstract herbal of Chinese theeffectsthe Objective：Tostudy lipopolysacchaides(LPS)and andacute human bloodcells the on wall—adhering Reduqing(RD01 preparation oftheinflammation