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电针对兔膝骨关节炎软骨水通道蛋白3表达的影响 摘 要 破坏以及骨赘形成为特征的慢性骨关节病，好发于膝关节、髋关节、脊柱 以及远端指间关节等负重较大的关节。临床可产生关节疼痛，活动受限和 关节畸形等症状。膝关节是OA最常发生的部位，研究发现水通道蛋白 表达明显高于正常关节软骨细胞。膝OA作为一种老年进行性退化性疾病， 目前尚无彻底治愈的手段，主要采取手术和非手术治疗来延缓病情的进展， 而电针是一种具有较好临床疗效的非手术治疗方式。目前电针治疗膝OA 的临床观察较多，但以其作为干预手段进行作用机制研究的动物实验却比 较少见。因此，本课题采用管型石膏伸膝位固定制动法固定6周制作兔膝 OA模型，电针干预4周的治疗，来探讨电针对兔膝OA发展及其关节软 行性，为膝OA的治疗寻找新靶点。方法：(1)预实验：泸州医学院实验 动物中心采购健康新西兰大白兔5只，雌雄不拘，重量2．3．3．2k，取右后 膝关节用管型石膏固定在膝关节伸直位，固定范围从腹股沟平面下1．5cm 到踝关节下3cm处。制动6周后，手术刀切取股骨内侧髁及胫骨平台的软 骨组织，进行苏木精．伊红染色。结果可见软骨细胞排列紊乱、有增生，软 骨表面变薄、有裂隙产生、软骨组织纤维化，软骨和滑膜肿胀，有炎细胞 的浸润，滑膜增生。与骨关节炎的病理表现复合，说明造模成功。(2)对 象和干预措施：泸州医学院实验动物中心再次采购健康新西兰大白兔36 只，雌雄不拘，重量2．3．3．2埏，采用随机数字表法将36只白兔随机分成 空白对照组、模型组和实验组，每组各12只。空白对照组不做任何处理， 模型组和电针治疗组均造模，6周后，取下石膏管型。模型组造模后不做 电针治疗，只在电针治疗组电针的同时用相同的姿势绑在治疗台上；电针 治疗组自取下石膏当天开始给予电针治疗。取血海、犊鼻、阴陵泉、阳陵 泉、足三里、梁丘6穴，接3组电针仪输出线，输出频率为2Hz的疏波， 评分标准对空白对照组、模型组、电针治疗组3组兔右后膝关节软骨大体 形态采用肉眼观察的方法进行量化评分；②手术刀切取空白对照组、模型 组、电针治疗组3组兔右后膝关节的股骨内侧髁软骨，用10％中性甲醛溶 标准对软骨细胞的形态采用光镜的方法对观察结果进行量化评分；③酶联 immunosorbent 免疫吸附剂测定(enzyme．1inked 关节液中AQP3的表达。 行统计学分析。所得计量资料结果采用i士s表示，采用t检验比较兔软骨 细胞评分、软骨结构评分、HE染色评分和潮线完整性评分，以P0．05为 有统计学意义。结果：(1)软骨大体形态观察：空白对照组12只兔右后膝 关节无关节积液，无炎性细胞的浸润，软骨表面光滑、无裂纹，呈蓝白色， 出现明显关节积液，软骨表面粗糙、有裂纹、光泽度降低，有炎性细胞的 浸润，软骨表面呈灰黄色，部分出现糜烂和溃疡；电针治疗组与模型组情 况类似，但损害程度较轻，按改良的Mankin’S评分比较软骨结构，差异有 细胞位置排列整齐，细胞大小相同，潮线完整；软骨层厚度一致，软骨表 面平坦整齐；模型组软骨层存在缺损，软骨层变薄，软骨细胞减少明显， 细胞大量簇聚，潮线紊乱；电针治疗组关节软骨表面无明显缺失，软骨细 胞排列较模型组整齐，数量较模型组增多，层厚较模型组增厚，可见潮线 紊乱。将空白对照组与模型组、模型组与电针治疗组的改良的Mankin’S评 明显高于空白对照组和电针治疗组(尸O．05)。结论：(1)管型石膏伸膝位 固定制动法成功建立了兔膝骨关节炎模型。(2)膝OA关节软骨中AQP3 表达增强。(3)电针能够有效缓解膝OA的症状，其作用机制可能与通过 减少AQP3的含量调节水的转运，降低细胞基质的降解，减轻对关节软骨 的破坏，从而缓解膝OA的进程有关。 关键词：骨关节炎；关节软骨；电针；水通道蛋白3 Effectsof treatmenton of in expressionAQP3 electro—acupuncture cellsofrabbitwithkneeosteoarthritis cartilage achron