混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色.ppt

水溶C100饮料中还原型维生素C的测定 ----2, 6-二氯酚靛酚滴定法 一、目的 了解营养评价中实验室检查的意义 了解食物中还原型VitC测定方法 二、原理及步骤 用标准维生素C溶液标定2, 6-二氯酚靛酚染料； 用标定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品，测得其还原型维生素C的浓度。 1、标准维生素C溶液标定2, 6-二氯酚靛酚染料 （1）原理 VitC+（红色）2, 6-二氯酚靛酚脱氢 脱氢 VitC+（无色）还原型2, 6-二氯酚靛酚 （2）步骤 0.1%抗坏血酸标准母液（1mg/ml），冰箱保存待用（已配制）。 配制1%草酸溶液：1g草酸充分溶解后→洗入100ml量筒中，加蒸馏水至100ml刻度，搅匀→备用（已配制） 。 配制抗坏血酸标准应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准母液于50ml容量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。（1mg/50ml） 空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录结果Cml。（两次） 标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸标准应用液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录所用染料Aml。 （两次） （3）操作 （4）1ml染料相当于还原型维生素C的mg 3、用标定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品，测得其还原型维生素C的浓度 （1）原理 同2（略） （2）步骤 水溶C100饮料稀释液制备：市售水溶C100饮料冰箱待用。使用前用草酸溶液稀释N倍（已制备）。 水溶C100饮料稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml水溶C100饮料稀释液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录结果B ml。（两次） （3）操作 （4）样品中维生素C浓度 三、注意事项 测定过程要迅速，因还原型维生素C易被氧化，一般不超过2min; 样品中可能有其他杂质也能还原2, 6-二氯酚靛酚，但还原速度比还原型维生素C慢，故滴定时以15s内粉红色不褪去为止； 维生素C标准品粉末：棕色干燥皿内保存； 维生素C标准品溶液：短期、棕色瓶、冷藏； 2, 6-二氯酚靛酚溶液：50mg溶解于NaHCO3(0.2g/ml)热溶液中，冷却后4℃过夜，过滤后用蒸馏水定容250ml，然后短期、棕色瓶、冷藏； 各种蔬菜水果中的vic的含量 No.1 樱桃 50g 12粒 500mg No.2 番石榴 80g 1 个 216mg No.3 红椒 80g 1/3个 136mg No.4 黄椒 80g 1/3个 120mg No.5 柿子 150g 1 个 105mg No.6 青花菜 60g 1/4株 96mg No.7 草莓 100g 6粒 80mg No.8 橘子 130g 1 个 78mg No.9 芥蓝 60g 1/3株 72mg No.10 猕猴桃 100g 1个 68mg 实验步骤： 配制抗坏血酸标准应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准母液于50ml容量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。 空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录结果Cml。（两次） 标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸标准应用液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录所用染料Aml。1ml 二氯酚靛酚相当于抗坏血酸Tmg，T=0.1/（A－C）。（两次） 水溶C100饮料稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml水溶C100饮料稀释液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录结果Bml。（两次） * * 2, 6-二氯酚靛酚染料 A: 抗坏血酸标准应用液 (5ml) +草酸（5ml，1%） 滴定 无色变为淡红色 15s内不褪色 C: 空白组为草酸（10ml，1%） T = 0.1 A-C（ml） 2, 6-二氯酚靛酚染液 B: 稀释后的样品（5ml）+草酸（5ml，1%） 滴定 无色变为淡红色 15s内不褪色 C样（mg/ml）= （B － C）× T 5 ml × N