实验九利用不同的方法筛选转化子级.ppt

实验九 利用不同的方法筛选和鉴定转化子 综合性、设计性实验 1、指导思想 学生经过前期的实验已经基本掌握了本门实验课程的基本理论和基本技术。所以设置一个综合性的实验，以培养学生的综合能力和创新能力。本实验的内容包括了以前所有实验的的基本原理和基本技术，学生可以根据实验要求，运用学过的知识和技能，自己设计实验方案，筛选出转基因菌株即目的重组子。 2、实验目的 通过不同方法，筛选获得转基因菌株。 3、实验要求 根据实验要求，运用学过的知识和技能以及查阅 相关资料，先设计实验方案，提交老师批阅认可； 再独立进行实验准备和实验，筛选出转化子； 实验结束，撰写综合性实验报告，即小论文1篇。小论文要求：字数不少于3000，包括论文题目、作者、摘要、关键词、引言、材料与方法、结果与分析、结论或讨论、参考文献。 4、涉及的内容或知识点 抗性筛选——转化子； 菌落直接PCR的分子鉴定——转基因大肠杆菌； 质粒提取及大小鉴定——转基因大肠杆菌； 质粒酶切鉴定——转基因大肠杆菌。 * 正向引物（P1） EcoRI 5’-CGCGAATTCATGGCAGATCAGCTCACCGATGATC-3’ 反向引物（P2）： Not I 5’-AGAGCGGCCGCCTTTGCCATCATAACTTTGACAAA-3’ ATGGCAGATCAGCTCACCGATGATCAGATCTCTGAGTTCAAGGAAGCTTTTAGCCTTTTCGACAAAGACGGAGATGGTTGCATCACAACGAAAGAGCTAGGAACAGTGATGAGATCATTAGGTCAAAATCCAACAGAAGCAGAGTTACAAGATATGATAAACGAAGTAGATGCTGATGGTAACGGAACCATAGACTTCCCTGAGTTTCTGAACCTAATGGCTAGGAAGATGAAGGACACTGACTCTGAAGAAGAGCTCAAAGAAGCTTTCAGGGTTTTCGATAAGGACCAGAACGGTTTCATCTCGGCAGCTGAGTTAAGACATGTAATGACAAATCTTGGTGAGAAGTTAACTGATGAAGAAGTTGATGAGATGATCAAAGAAGCTGATGTTGATGGAGATGGTCAGATCAATTATGAAGAGTTTGTCAAAGTTATGATGGCAAAG *