在生产规模Chromaflow柱中填充MabSelect的放大.PDF

在生产规模Chromaflow 柱中填充MabSelect 的放大方法 摘要 MabSelect 被广泛用于单克隆抗体（MAbs）的商业生产。 MabSelect™亲和介质用于单克隆抗体（MAbs）的规模生产。 Chromaflow 是一系列的生产规模层析柱，主要用于GMP 生 将层析介质正确地填充到生产规模的柱中，是获得可靠的、 产。因此，单克隆抗体（MAb ）生产厂家对 MabSelect 和 经济上可行的纯化工艺的先决条件。 Chromaflow 的组合非常感兴趣。所以，需要一种简单的、可 本应用文献介绍在生产规模层析柱 Chromaflow™ 600 中填 靠的、可放大的方法，用于在大尺寸 Chromaflow 柱中填充 充MabSelect 的方法，该方法简单快捷，便于执行。从效率 MabSelect。本应用文献介绍了一种Chromaflow 600 （内径： 和稳定性方面来讲，该方法提供了一个填充良好的柱床。位 600mm）的装柱方法，并且对从层析柱床中获得的关键试验 于层析柱顶部和底部的专利设计三位喷嘴 （nozzle ）得到了 数据进行了总结。 充分的利用。简单来说，将层析介质MabSelect 匀浆以近似 1500cm/h 的流速喷入到层析柱柱中，直至距离层析柱床顶部 产品特征 0.5cm 为止。然后关闭泵，让层析介质膨胀填满最后的 MabSelect 0.5cm，从而完成层析柱填充。 MabSelect 是一种重组Protein A 亲和介质。与传统的交联相 测试后，填充好的层析床表现极佳柱效以及对称性。压力/流 比，其经过优化的交联琼脂糖骨架产生的流速至少高出5 倍。 速曲线显示，流速在500cm/h 下的压降低于1 巴。 此外，它的重组 Protein A 的设计中含有一个羧基末端半胱 填充方法应同样适用于Chromaflow 系列中更大的层析柱。 氨酸，并且设计了耦合条件，能够与层析骨架的单点连接， 以上两项设计均增强了IgG 的结合能力。在流速为500cm/h 简介 的条件下，在高度为20cm 的层析柱床，MabSelect 的动态 对于生物制药中生产规模层析柱的使用，良好的装柱方法对 载量通常为每毫升层析介质30 毫克多克隆抗体。 于任何层析工艺起到至关重要作用。如果层析柱床的填充过 Chromaflow 柱 于紧，可能造成裂缝，从而导致沟道效应和样品流穿过早。 Chromaflow 是一系列的生产规模层析柱，主要用于GMP 生 如果层析柱床的填充过于松，可能在使用中使层析介质进一 产。专利设计的位于填充柱顶部和底部的三位喷嘴（Nozzle）， 步压缩，在层析介质与层析柱头产生一层液体，会导致样品 以上设计确保层析柱在位的情况下进行装填、卸料和清洗（图 混合现象。上述两种情况下，都将导致工艺中断以及贵重产 1）。标准产品的层析柱规格：从内径400mm 至2000mm。 品的损失。适当的装填方法能够消除这种现象，并且确保了 所有操作压力为3 巴。 层析柱床的稳定性，能够在多次处理循环中按照预期执行。 Chromaflow 柱简化了层析工艺，从而降低了劳动成本，提高 了便利程度。从而手动操作达到最小化，帮助实现重复填充 以及重现结果。因为所有的层析柱操作都在一个“封闭的”环境 下进行，所以整体安全性和卫生得到大大改善。 装柱方法 先前在其它层析柱中装柱研究中，包括 Chromaflow 400， ] h MabSelect 层析介质表现出了（图 1）具有良好的压力/流动 / m