绵羊玻璃化冷冻胚胎直接移植试验研究.pdfVIP

摘要 本研究应用EFS40玻璃化液对6．5～7日龄的绵羊胚胎进行玻璃化冷冻及解冻后直接 移植试验。掰用胚骀郝是经FS}{超费#处理绲羊获褥的。艇脓经形态攘定后，蹦胚骀存放 液(含20“FCS的PBS液)清洗。冷冻前，胚胎在室温(18-25℃)下置于含10％乙二 醇的PBS液中平衡10分钟，穆入玻璃化液EFS40中装臀并平衡30秒钟，液氮气中熏 蒸2努锋螽投入液氮审傈存，熬冻嚣在筑滠(t8-25℃)空气浴10移镣嚣，32℃承浴20 秒钟解冻。 试验1：胚胎解冻后以0．SM蔗糖液一步(6分钟)除去保护剂或用珏胎存放液一步 赢援除去傈护荆，然艏胚胎移入胚胎存放液中洗3次，将形态正常的胚胎手术移植至同 明辩完整率为100％(27／27)；彤态完整举为77．78％(21／27)，移植届的妊娠窭为4737％ (9／19)，胚胎存活率为42．86％(9／21)，其中桑椹瓤、囊疆的冻后形态完整率分羽为81．82 ％(9／11)、75．00％(12／16)(P0．05)，差异不驻著；桑椹胚和囊胍移植后的妊娠率分 差择均不显蓿(Po．05)。13枚冷冻胚腑解冻后用0．5M蔗糖脱防冻荆，其中lO枚形态 恢复正常(76．92％)，与直接用胚胎存放液脱除防冻剂的结果(78．57％，11／14)无差异 (P0．05)。将两种方法解冻鹩形态正常的嚣胎移植，移攮后的鳋娠率分剐灸44．44％ 差努不显蓑；试验2将lO投解冻蠢豹憝齄细营内髓茨冻裁嫠，壹接装警移擅绘8爰受髂 (其中2只受体移植双胚)，妊娠率为50．oo％(4／8)，胚胎成活率为柏．00％(4／10)，(麓 中受体1只在妊娠后第2个月流产，最艏有3只爨体产3只羔羊)与同期常规冷冻解冻 缀辎院无显藩差异(P0．05)。， 本研究结果表明：绵羊胚胎应用EFS40进行玻璃化冷冻．解冻偌用胚胎存放液细管 内脱除防冻刹螽直接移植获褥较糍的的妊娠率和疑始存活攀。该方法与常规方法比较麓 便、省时、可普及，特别是能降低绵羊胚胎移植的成本，加速绵羊品种改良。 关键词：缡羊：坯鼢：玻璃纯；EF$40；壹接移楗 V DirectTransferofVitrified Embryos Sheep Abstract Direettransferofvitrified from on6．5～7 afterthe we踏obtained donors studied．Embryossurgicallysupemvulated days OIISctofastms(onset to graded morphology,embryos ofes删day)．A腑rbeing according wc黪w笛k畦in solution(PBSwith those embryo supplemented20％FCS)。only holding as were at classifiedexcellentand Wele vitrification,embryoskept good processed．Befom glycol(EG)， withEG豹％and and for30seeintovitrificationsolutionEFS40(PBS-FCS finally