肝X受体激动剂通过上调NPC1基因的表达减轻apoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变程度.pdf

中国科学 C 辑 :生命科学 2008 年 第 38 卷 第 4 期 : 356 ~ 367 SCIENCE IN CHINA PRESS 肝X 受体激动剂通过上调NPC1 基因的表达减轻 apoE 基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变程度 ①②† ①† ③ ① ① ① ① 欧翔 , 代小艳 , 龙治峰 , 唐雅玲 , 曹冬黎 , 郝新瑞 , 胡炎伟 , 李晓旭①, 唐朝克①* ① 南华大学心血管病研究所, 动脉硬化学湖南省重点实验室, 衡阳 421001; ② 韶关学院医学院生理学教研室, 韶关 512026; ③ 南华大学组织胚胎学教研室, 衡阳 421001 † 同等贡献 * 联系人, E-mail: tchaoke@ 收稿日期: 2007-11-28; 接受日期: 2008-01-03 国家自然科学基金(批准号:和湖南省自然科学基金(批准号: 06jj5058)资助项目 摘要 本文研究肝X 受体(LXR)激动剂对apoE 基因敲除小鼠NPC1 表达的影响. 52 关键词 只雄性apoE 基因敲除小鼠被随机分成4 组: (a)基础组(baseline group, n = 10); (b)对照 C 型1 类尼曼- 匹克蛋白 组(control group, n = 14); (c) LXR 激动剂治疗组(treatment group, n = 14); (d) LXR 激动 肝X 受体激动剂 剂预防组(prevention group, n = 14). 各组小鼠均被给予高脂/高胆固醇饲料喂养; 基 动脉粥样硬化 础组小鼠被赋形剂灌胃处理8 周; 对照组小鼠被赋形剂灌胃处理14 周; LXR 激动剂 斑块 治疗组小鼠在前8 周被赋形剂灌胃处理, 后6 周被T0901317 灌胃处理; LXR 激动剂 预防组小鼠被T0901317 灌胃处理14 周. 采用实时定量PCR, Western blot 和免疫组 织化学方法分别检测组织中NPC1 mRNA 和蛋白质的表达; 采用酶法测定血清中总 胆固醇(TC) 、甘油三酯(TG) 、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)、载脂蛋白A- Ⅰ(ApoA- Ⅰ)和载脂蛋白B(ApoB)含量. 另外, 我们采用RNA 干扰技术沉默人 THP-1 巨噬细胞NPC1 基因表达, 并将细胞诱导成泡沫细胞, 检测 T0901317 对该细胞胆固醇流出的影响. 结果显示, LXR 激动剂治疗组和预防组小鼠 的血浆TC, TG, HDL-C 和ApoA- Ⅰ水平都较对照组明显增高(P 0.05); LXR 激动剂 治疗组和预防组小鼠的主动脉粥样硬化斑块和脂质条纹明显少于对照组(P 0.05), 其中治疗组减少了58.3%, 预防组减少了64.2%; LXR 激动剂治疗组和预防组小鼠的 小肠组织、肝脏组织和主动脉NPC1 表达上调(P 0.05); 和正常THP-1 巨噬细胞源 性泡沫细胞比较, RNA 干扰组胆固醇流出明显减少, T0901317 处理组胆固醇流出明 显增加. 总之, LXR 激动剂T0901317 能减轻高脂高胆固醇饲料喂养的apoE 基因敲除 小鼠动脉粥样硬化病变程度并上调肝脏组织、小肠组织和主动脉NPC1 的表达, NPC1 基因沉默能使细胞胆固醇流出减少. 356 中国科学 C 辑: 生命科学 2008 年 第 38 卷 第 4 期 单核细胞移行到血管内皮下分化为巨噬细胞, 最近研究表明, LXR激动剂可上调体外培养的巨 巨噬细胞在摄取大量脂蛋白来源的胆固醇后转变为