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花鲈(Lateolabrax japonicus)和真鲷(Chrysophrys major)胚胎干细胞生长及体外分化的研究
海水鱼类胚胎予缨施的生长及搏终分化鹃磅变
摘要
胚胎干细胞(Es细胞)是从动物早期胚胎的内细胞团藏原始生
殖细胞分离出来的其有发育全能性的一种未分化的无限增麓缅施系。
本文通过对海产名贵经游鱼类花鲈题驻予细胞(LJESl)、真鲷题黪于
细胞(SBESl)的长期培养，得出了海水鱼类ES细胞的生长特征，目
干纲脆系(LJESl生长逐速，援种后60小时左右细脆增盛速率达到
最大，本实验羽褥LJESl纲魏第13、35、朝代时的生长鏊线，计算
20—28。C，葵最适生长温度为24—28℃，28℃细胞生长速度达到最大，
培养渡酶适宜鹾涛7。2-7。4。在实验过程中，我翻还囊寨到LJeSl
细胞槎240c下最容易贴壁，温度过高或过低对细胞的贴壁都不利。
在花鲈、真鲷Es细胞长期传代培养过程中，维持其体外生长、
增殖及未分化状态需要在培养基中添加～些生长因子。本实验通过配
刳省略l秘蠛多季孛因子酶培养基PESMO-lO，计数LJESl纲腿在各培
养基中增殖的数量，确定备种生长因子对花鲈ES细腿(LJESl)增殖
的作用。同时，对LIF因子和bFGF因子的作用进行了重点的研究，
发现LIF因子对早期的LJESl细胞增殖几乎没有作用，其主疆作用是
的作用；bFGF因子对LJESl细胞有强烈的刺激生长、增殖的作用；
增殖，2一巯基乙醇(2一ME)具有还原血清中的含硫化合物、防止过氧
化物对LJESl细胞的损害及促进贴壁的作用，因而也促进了LJESl细
胞的增殖。
LJESl和SBESl都具有发育上的多能性，在适合的条件下，可以
诱导分化为成纤维细胞、肌肉细胞、神经细胞、神经胶质细胞等各种
类型的细胞。在全反式视黄酸(RA)的作用下，可以诱导分化为几种
类型的细胞；尤其是RA在适当的条件下可诱导90％以上的LJESl和
SBESl分化为神经胶质细胞。在分化诱导培养基中可分化为各种类型
的细胞，且不同细胞出现的时间不同。在低浓度血清作用下，花鲈胚
胎干细胞可以向树状肌肉细胞分化。拟胚体在不同的条件下可以分别
诱导分化为树状肌肉细胞和神经细胞等。
关键词： 花鲈，真鲷，胚胎干细胞，生长特征，生长因子，成纤维
生长因子，白血病抑制因子，体外分化，拟胚体
of
Orm积chand lnvitro
differentlation
embryoniC
I sea
stem—Ii keceI Sderi vedfrom
red
sea
bream(Chrysophrysmajor)
japonicus)and
Abastract
areundifferentiated
stem(ES)cellS permanent
Embryonic
cellsor
cell】inesderivedfrominnercellmass primordialgerm
havebeen
celtSof cell1ines
early embryos．ES-1ike
developing
establishedsea
in perch(Lateolabrax
red
sea
bream(Chr
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