检测及其临床应用.ppt

TMB 四甲基联苯胺 * * * HLA-B27检测及其临床应用 许泼实 河南省人民医院检验科 * HLA-B27及其临床应用 什么是HLA及HLA-B27 MHC、HLA、亚型、关联、RR HLA-B27与哪些疾病相关 血清阴性脊柱关节病 类型及特点 强直性脊柱炎 特点及其与B27关联机制 HLA-B27 怎么检测 MLCT、ELISA、IMS-ELISA、FCM、PCR-SSP * HLA相关概念 主要组织相容性抗原 主要组织相容性复合体（ MHC ⅠⅡⅢ类)：H-2 SLA HLA MHC、HLA复合体……基因 MHC分子、HLA分子……抗原 HLA：人类白细胞抗原（ Human Leukocyte Antigen） * HLA相关概念 * 不同地区HLA-B27亚型的流行病学分布 欧洲、非洲 2705、2702、2707 东南亚（印尼、马来西亚、泰国） 2706、2704、2705 中国、新加坡、日本 2704、2705、2707 HLA-B27相关疾病 * 疾病 HLA-B27阳性率(%) 强直性脊椎炎 90 银屑病性关节炎 ? 55 Reiter’s综合症 37 反应性关节炎 沙门氏菌感染 29.7 志贺氏菌感染 20.7 耶尔森氏菌感染 17.6 淋病双球菌感染 14.0 正常人群 ? 2～7 血清阴性脊柱关节病共同特点 RF（一） 家族聚集现象 与HLA-B27不同程度相关 皆可影响脊柱，都有不同程度的骶髂关节炎，也可影响外周关节，下肢关节多于上肢关节，且呈不对称性。 与革兰氏阴性杆菌有一定相关性： 强直性脊柱炎与肠道肺炎克雷白杆菌相关 Reiter综合征与沙眼衣原体、福氏痢疾杆菌相关 反应性关节炎与沙门杆菌、痢疾杆菌、耶尔森菌和HP相关 * 血清阴性脊柱关节病共同特点 临床上有很多共同或重叠之处： 眼炎，尿道炎，前列腺炎，口腔、肠道和生殖器溃疡结节性红斑，银屑病样皮疹坏死性脓皮病，血栓性静脉炎 基本病理变化以肌腱端周围和韧带附着于骨的部位为主(附着端炎)而非滑膜，也可发生在眼、主动脉瓣、肺实质和皮肤，而不同于以滑膜病变为主的类风湿性关节炎，而且无类风湿皮下结节。 * HLA-B27相关疾病：强直性脊柱炎 Ankylosing Spondylitis，AS 患病率：0.3%，20-30岁，男女比例 10:1，有家族倾向； 主要侵犯：中轴关节（骶髂关节、脊柱骨突、脊柱旁软组织） 可伴发外周关节及关节外表现，严重者发生脊柱畸形和关节强直 B27检测可作为有相关症状或高危人群AS早期的筛选方法！ AS不是RA的一种特殊类型！ * 强直性脊柱炎 类风湿性关节炎 地区分布 种族差异大 世界性 性别分布 男＞女 女＞男 年龄 20-30 30-50 家族史 明显 不明显 类风湿因子 （－） （?） HLA-B27阴性的AS 约5-10%的AS患者为HLA-B27阴性 AS患者的HLA-B27阳性率达90-95% 我国汉族人群HLA-B27阳性率2-7%（3千万-1亿），AS患病率为0.3%（＞4百万），大部分HLA-B27阳性者并不发生AS。 HLA-B27与AS * HLA-B27与AS * 健康人群HLA-B27阳性率及AS患病率各地区、种族有显著的差异 HLA—B27与强直性脊柱炎的发病有很强的相关性 两种错误认识：HLA-B27阳性≠AS！ HLA-B27阳性不会转阴！ HLA-B27阳性率 AS患病率 AS患者B27阳性率 中国人 2-7% 0.3% 90～95% 欧洲白种人 4～13％ 1％ 80～100% 南非黑人 1％ 很低 22% 美国黑人 2～4％ 57% 印地安人 9～50％ 6～12％ 80～100% HLA-B27与AS的关联机制 连锁不平衡学说 分子模拟学说 关节源性肽假说 其他：T细胞受体库假说超抗原假说B27修饰因子假说Cys67模型 * 张谷香．医学综述，2012,18(4):498-501 HLA基因座位的等位基因和真正的疾病易感基因处于紧密连锁不平衡，而HLA基因本身并不是引起疾病的真正基因，仅仅是遗传标志。 B27抗原与某些G（-）菌之间存在类似的分子结构，能发生分子模拟或交叉反应，机体免疫系统把B27当作病原体抗原产生免疫应答，对机体产生免疫损害。 认为关节源性肽只存在于关节组织中，特异性地由HLA—B27提呈，正常情况下递呈水平低，反应T细胞处于耐受状态；当某些具有同源结构蛋白的病毒或细菌感染时，则可致敏耐受的T细胞，从而识别以低水平递呈的关节源性肽，引起自身免疫反应而损伤组织。 HLA-B27检测方法及评价 抗原水平 微量细胞毒法 84% ELISA IMS-ELISA 88% 流式细胞术法 93% 基因水平 P