新鹅蟊藿香粒天灸对过敏性鼻炎小鼠的实验研究---刘素文 刘洋.docVIP

鹅蟊藿香粒天灸对过敏性鼻炎小鼠的实验研究 刘素文，刘洋 （湖北省襄樊市中医院，441000） 【摘要】 目的：探讨鹅蟊藿香粒天灸穴位敷贴对过敏性鼻炎动物的EOS、MC、IL-4、IgE影响。方法：采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏与雾化吸入激发的方法建立小鼠过敏性鼻炎模型。将实验小鼠随机分为4组：正常对照组、模型对照组、阳性对照组、天灸治疗组。观察各组症状，记录过敏潜伏期，对鼻黏膜组织病检并对EOS、MC计数，检测血浆IL-4和IgE的含量。结果：与模型组比较各给药组对过敏性鼻炎潜伏期均有不同程度的延长作用，特别是鹅蝥藿香粒天灸治疗组与模型组有极显著性差异(PO.01)，病理变化得到明显改善，EOS、MC、IL-4、IgE下调明显。结论：鹅蟊藿香粒天灸对过敏性鼻炎动物有较好的治疗作用。 【关键词】鹅蟊藿香粒天灸；过敏性鼻炎；EOS；MC；IL-4；IgE 过敏性鼻炎 (allergierhinitis，AR)也称变应性鼻炎，中医认为本病当属“鼻鼽”范畴，其发病乃肺气虚弱，卫外不固，腠理疏松，风寒之邪乘虚而入，肺受寒邪，肺气失宣，则鼻窍不利，而致鼻鼽，现代医学认为本病是由变应原激发的、由IgE介导的鼻黏膜炎症反应性疾病。AR的主要临床表现有鼻塞、流鼻涕、鼻痒、打喷嚏以及嗅觉功能障碍等。鹅蝥藿香粒是襄樊市中医院刘素文主任医师根据祖国医学内病外治、冬病夏治的理论及多年临床经验研制而成，其方由鹅不食草、斑蝥、细辛、藿香等中药组成，采用穴位敷贴天灸疗法, 用于防治小儿过敏性鼻炎。本实验主要研究了鹅蟊藿香粒天灸对实验动物整体过敏性鼻炎症状及潜伏期和过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中EOS、MC、IL-4、IgE的影响。 1 实验材料 1.1 实验药品 鹅蝥藿香粒天灸: 由鹅不食草、斑蝥、细辛、藿香组成；（襄樊市中医医院药剂科，批号；布地奈德鼻喷雾剂：阿斯利康制药有限公司.瑞典，进口药品注册证号：批准文号:国药准字 批号:0901005； 1.2 实验动物 清洁级健康小鼠40只，雌雄各半，体重20±2g，购自华中科技大学同济医学院实验动物中心，实验动物质量合格证编号:NO 动物饲养：温度20±2℃，湿度40～70％，自然采光。不锈钢笼饲养，自由摄食进水。 1.3 实验试剂 卵白蛋白：sigma分装，A5378；氢氧化铝：上海试一化学试剂有限公司，批号：0909008；白细胞介素-4放免药盒：美国RD公司进口分装 (Batch No. 1002125)； IgE放免药盒：美国RD公司进口分装 (Batch No. 1001034)。 1.4 实验仪器 鱼跃402A1超声雾化器：江苏鱼跃医疗设备股份有限公司；THZ-103B恒温培养摇床：上海一恒科技仪器有限公司；LeicaRM2135石蜡切片机：德国莱卡公司；Olympus CX-41生物显微镜及成像系统：日本奥林巴斯OLYMPUS；Synergy 2多功能酶标仪：美国Biotek公司。 实验方法 2.1 造模方法 本实验参照文献[1]，采用卵白蛋白(OVA)注射雾化吸入法复制过敏性鼻炎小鼠模型。实验第ld，临时配制10%卵蛋白和10%AL(OH)3生理盐水溶液，每只小鼠腹腔注射OVA溶液0.2ml以致敏。注射后第15d，将致敏小鼠分别置透明密闭玻璃容器中，以5%OVA生理盐水溶液按最大雾化量进行雾化吸入，出现抓搔、鼻塞、喷嚏、呼吸急促深快、流涕等症状时为造模成功，约连续激发7d。 2.2 分组与给药 小鼠取二个穴位：大椎，肺俞（双），给药方案： 0.1g, 给药面积为3.14mm2即直径为2mm的圆孔，每次2h。 小鼠40只，雄性，体重20±2g。随机分为4组，每组10只，包括正常对照组、模型组、鹅蟊藿香粒天灸治疗组、布地奈德阳性对照组。除正常组外均采用雾化吸入法复制过敏性鼻炎。 各组分别于造模第8天起给药。操作时先用脱毛膏将小鼠颈背部毛脱掉约2cm×3cm大小面积。鹅蟊藿香粒天灸组每只给鹅蝥藿香粒天灸贴敷，布地奈德组给布地奈德鼻喷雾剂，连续给药7d。各组均于雾化吸入前4h给药。 2.3 鼻部症状观察 观察各组小鼠一般状态，以出现抓搔、鼻塞、喷嚏、流涕、烦躁等表现为激发成功。观察鹅蝥藿香粒天灸组和布地奈德鼻喷雾剂对过敏性鼻炎小鼠呼吸状态的影响。 2.4 对过敏性鼻炎小鼠过敏潜伏期的观察 在末次气道吸入激发时，记录小鼠出现全身抓搔、鼻塞的时间记录为过敏潜伏期。如超过6min,仍不出现上述表现者，其潜伏期以360s计。 2.5 对过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜组织形态及EOS、MC数量及血清中IgE、IL-4含量的观察。 小鼠处死后，暴露鼻中隔前中段，取鼻黏膜，10%甲醛溶液中，固定24h，切片